Determinarea zaharurilor reducătoare Bertrand - agroarhiv materiale agricole

Zaharuri cu aldehidă sau cetonă grupări libere, au capacitatea în anumite condiții, pentru a restabili soluții alcaline de oxid cupric la oxid, care poate fi reprezentat în greutate sau volum. Metoda dă rezultate bune atunci când conținutul de glucoză în soluția de testat într-o cantitate de la 10 până la 90 mg. Ar trebui să se evite prezența simultană în soluțiile de săruri de amoniu, aminoacizi și peptone care facilitează traducerea precipitatului de oxid cupros într-o stare solubilă. Aceasta exclude aplicare acid acetic tricloroalcan pentru purificarea proteinelor, deoarece condițiile de experiment oxidat oxidul cupros prin respectivul acid.
Metoda Bertrand este aplicabilă pentru determinarea glucoză, fructoză, galactoză, manoză, sorboză, pentoză, arabinoză, dihidroxiacetona precum și pentru zahărul invertit - maltoză și lactoză. Pentru fiecare dintre acești compuși au tabele speciale, care sunt date raportul cantitativ dintre cuprul recuperat și zahăr.
La determinarea zaharurile din materialul de testat trebuie să elimine proteine ​​și multe altele de substante interferente. În acest scop, o soluție de metale grele, cum ar fi sărurile de mercur, acetat de plumb, reactiv Barnshteyna (soluții de sulfat de cupru și alcaline), hidrat, oxid de zinc, cadmiu oxid hidrat și altele.
Principiul metodei se bazează pe capacitatea de oxid de cupru într-un mediu alcalin pentru a oxida compus aldehidă pentru a da un precipitat roșu de oxid cupros. Când acest oxid cupros în prezența acidului sulfuric este oxidat sulfat de fier feric, care este astfel restabilită

Cantitatea de fier redus este luată în considerare prin titrare cu soluție de permanganat

Din aceste ecuații rezultă că traducerea atomului de cupru cupros 1 corespunde la 1 atom de fier; 10 atomi de fier au 2 molecule de permanganat, t. E. Cu 10 atomi de fier au permanganat și cupru atomii 2 moleculă 10 (635.6 g) și 2 molecule este permanganat (360.8 g) și 1 ml de 2 corespunde KMnO4 01 mg de cupru. Cunoscând cantitatea de KMnO4 consumată pentru a identifica, se calculează cantitatea de cupru.
Reactivii necesari.
1. 40 g de sulfat de cupru pur recristalizată (CuSO4) dizolvat în apă distilată până la 1 litru; dacă este necesar, soluția este filtrată printr-un filtru de hârtie.
2. 200 g de sare Rochelle (sare dublă de sare de tartrat de sodiu și potasiu) S4N4O6KNa • 4N2O și 150 g de hidroxid de sodiu dizolvat în apă distilată și volumul ajustat la 1 litru. Dacă o soluție tulbure, trebuie filtrată, ci printr-un filtru de azbest și cât mai repede posibil.
Soluțiile (1, 2) sunt amestecate imediat înainte de definiția zaharurilor jumătate. Pentru fiecare determinare, prin luarea de 20 ml dintr-o soluție de 1-lea și la acesta se toarnă aceeași mililitri soluție de 1 (soluția Fehling). Respectarea acestor relații este o condiție esențială pentru funcționarea.
O soluție de oxizi de fier preparate în conformitate cu una dintre cele două modificări:
a) 50 g de Fe2 (SO4) 3 și 200 g (108 ml) de acid sulfuric concentrat se amestecă cu grijă cu apă distilată și se diluează până la 1 litru. Soluția nu trebuie să aibă un caracter de reducere, astfel încât soluția rezultată a fost adăugată în picături până când nonvanishing permanganatului dar foarte ușoară tentă roz;
b) în loc de sulfat feric poate lua 86 g de Alumen de fier (Fe2 (NH4) 2 (SO4) 4 • 24N2O), 200 g de acid sulfuric concentrat și apă până la 1 litru.
3. 5 g de permanganat de potasiu dizolvat în 1 litru de apă distilată. La această concentrație de permanganat fiecare mililitru de soluție corespunde la 10 mg de cupru rotunjite. Când se utilizează 0,1-n. Soluție de permanganat (3,16 g KMnO4 în 1 litru) fiecare mililitru corespunde la 6,36 mg de cupru.
La prepararea soluției de permanganat este convenabil să se folosească fiksanaly, dintre care 1 ml corespunde la 6.357 mg de cupru.
Definiția. Ia pipetarea 5-10 ml de soluție de testat, în funcție de conținutul estimat de zahăr într-un balon de 200 ml. Cantitatea de zahăr din eșantion ar trebui să fie de cel puțin 10 și nu mai mult de 100 mg. La soluția a fost turnată în 40 ml de amestec Fehling proaspăt preparat se amestecă și se încălzește rapid la reflux, care a fost menținut timp de exact 3 minute. Sincronizarea este realizată folosind o clepsidră, începând cu apariția de bule. După lichid de fierbere ar trebui să aibă o culoare albastră, indicativ de sulfat de cupru în exces. Dacă nici o culoare albastră, având mai mult de 100 mg de zahăr și de determinare se repetă cu soluție de testare mai puține.
La capătul balonului de fierbere a fost îndepărtat de la căldură, precipitatul rezultat a fost lăsat să se așeze și oxid cupros, îmbinând balon a fost aspirat cu o pompă de fluid turnat cu grijă pe un stick filtru prin aceeași margine loc conic. Pentru utilizare filtrare Filtre Schott sticla № 3, placa este plasată deasupra unui strat de azbest fibros. Precipitatul a fost oxid cupros nu tind să migreze la filtru, deoarece acesta formează un strat dens pe filtru cu dificultate cedat la dizolvarea ulterioară. După ce lichidul albastru filtrat, precipitatul rămas în vas se spală cu jet de apă fierbinte recent fiert, care este turnat pe filtru, dar nu complet, lăsând peste oxid de cupru mică cantitate de apă, pentru a evita contactul cu aerul. Spălarea cu apă pentru a produce dispariția alcalină la turnesol și se spală bine cu apă de funcționare peretele vasului și se filtrează. După aceea, din vasul de colectare se toarnă filtratul împreună cu soluțiile de spălare, vasul a fost clătit cu apă distilată și introdusă în ea refiltrarea. Pentru precipitatul de oxid cupros este turnat pentru a dizolva 5,10 ml dintr-o soluție de fier feric, clătind-le cu atenție peretele balon și soluția a fost de culoare verde deschis, se adaugă la filtru. Balonul a fost, din nou, se clătește cu 5-10 ml dintr-o soluție de fier feric, care fuzionează din nou la filtru. Acesta ar trebui să realizeze o soluție clară completă, dar nu-l expune, și un strat de suprafață de azbest pe filtru poate fi ușor vzmutit. Balonul și filtrul este apoi spălată cu atenție de mai multe ori cu porțiuni mici de apă fiartă recent, clătind balonul mai întâi, apoi se filtrează până la dispariție în spălările acide la turnesol. Când toate oxidul de cupru dizolvat va fi colectat într-un balon de primire, se procedează la imediat soluția de oxid de permanganat feros format titrat. Mergând lichid colorat în titrarea verde în roz este foarte marcată.
Titrul permanganat, exprimată în miligrame de cupru, t. E. Egal cu 6.357 mg, este multiplicat cu numărul de mililitri de permanganat îndepărtat soluția de testare de titrare. Deci, a determinat cantitatea de cupru, a participat la reacție. Conform Tabelului. 7 sunt, ce număr corespunde cantității de zahăr am obținut de cupru.