Cum de a păstra Botox în formele uscate și reconstituite

Utilizarea neurotoxină botulinică ca medicament necesită dezvoltarea proceselor de producție adecvate îndeplinesc cele mai înalte standarde de siguranță și calitate a produselor farmaceutice. Proprietățile excepționale ale medicamentului au condus la cerințele de siguranță nu numai pentru produse, ci și pentru personalul și condițiile de muncă în procesul de fabricație. În prezent, există un număr de produse clinice obținute prin diferite procese de fabricație și având diferite forme de dozare finale.

Specificitatea producției de toxină botulinică

Proprietăți de toxină botulinică

Elementul activ în preparatele de toxina botulinica (Botox sau BT) este un complex proteic obținut din Clostridium botulinum. Complexul este format din neurotoxină biologic active și mai multe proteine. În condiții fiziologice, se presupune că complexul este eliberat din neurotoxină pură.

Greutatea moleculară a complexului este de aproximativ 150.000 daltoni. Acesta constă dintr-o proteină cu lanț greu (aproximativ 100.000 Daltoni), și o proteină cu lanț ușor (aproximativ 50000 daltoni), conectate prin una sau mai multe punți disulfurice (Legăturile). Sistemul include, de asemenea, alte proteine ​​nontoxice având proprietăți de hemaglutinare.

Toxina botulinică - una dintre toxinele mai puternici în natură. Doza medie letală (LD50) BT serotipul A este 0,001 ug / kg.

Activitatea medicamentului este exprimată în unități (UI), o unitate corespunde cu doza letală medie pentru șoareci. În consecință, ED 50 înseamnă că conținutul flaconului 50 poate ucide șoareci. Pentru un om de 70 kg este considerată o doză letală de 3000 UI. Activitatea specifică a Botox® este de aproximativ 20 de unități / ng proteină din complexul neurotoxină. Botox-ul este utilizat pe scară largă în neurologie, reabilitare, urologie, tratamentul durerii, migrene dureri de cap, transpirație, precum și pentru procedurile estetice.

Utilizarea sigură și eficientă a medicamentelor pe baza Botox depinde de buna conservare a produsului, selectarea dozei corespunzătoare și utilizarea unor tehnici adecvate.

Producătorii de produse pe bază de toxină botulinică

În prezent, principalul producator de tip A Botox pentru utilizarea clinica este o companie multinationala Allergan (California, Statele Unite, Westport).

Mărci comerciale Allergan:

• BOTOX / BOTOX
• Cosmetice / Vistabel® / Vistabex® / Vista ™.
• Ipsen Pharma (Franța) și Wrexham (Marea Britanie)

Este al doilea ca mărime cu mărcile și Dysport Azzalure®. Merz Estetica (Germania) produce si branduri Xeomin® Bocouture®. Trei alți producători sunt în Asia. Medy-Tox (Coreea) a lansat un brand Meditoxin® / Neuronox® / Siax®, a cărei producție a început în Coreea, și este în prezent în curs de dezvoltare și în alte țări, cum ar fi în America Latină. Hugel Inc. De asemenea, cu sediul în Coreea, produce un alt tip de medicament A Botox numit Botulax (Zentox Regenox sau în altă parte). Institutul de produse biologice Lanzhou (LIBP, Lanzhou, China) a lansat un medicament autorizat BTXA, care este distribuit în Hong Kong, precum și în alte țări sub diferite denumiri:

• Lantox în România;
• Lanzox în Indonezia;
• Prosigne în Brazilia;
• Liftox în Ecuador;
• Redux în Peru (medicamentul este disponibil în mai mult de 30 de țări).

Tip B serotip Botox numit MYOBLOC® / Neurobloc® produs US WorldMeds (Kentucky, SUA). Inițial, produsul a fost destinat pacienților care dezvoltă anticorpi la tip A. Medicamentul aprobat pentru utilizare clinică, dar pentru tratamentul necesită doze substanțiale de 50 de ori mai mare, decât tipul A, datorită activității inferioare pe unitatea de toxină. Produsul nu a fost utilizat în practica estetică.

România a înregistrat următoarele medicamente de tip A Botox: BOTOX®, Disport®, Lantox®, Xeomin®.

Producerea toxinei botulinice

Clostridium botulinum este o anaerobelor formatoare obligatorii ai spori. Această bacterie gram-pozitive, care se găsește în întreaga natură. Pentru producerea cu succes a materialului clinic este necesar să se respecte o serie de cerințe.
Cerințe anaerobe înseamnă că oxigenul trebuie excluși din mediul în primele etape de cultivare a bacteriilor într-un bioreactor (fermentator) sau vas de sticlă. Mediile de cultură tradiționale includ un agent de reducere pentru a menține condiții anaerobe precum azot suplimentar. În timpul creșterii bacteriilor produce un număr de acizi volatili, care sprijină mediul anaerob și determină aroma caracteristică a culturii în creștere.

Necesar să se respecte cele mai stricte măsuri de securitate pentru a preveni poluarea mediului. Gazele au evoluat în timpul etapelor de creștere și presurizat înainte de evacuare trebuie filtrată cu atenție pentru a elimina posibilitatea de separare a aerosolilor bacteriene.

La sfârșitul ciclului de viață bacteriană are loc în mod inevitabil sporulare. În produsul activ final conține sporii nu ar trebui, totuși adăugat la etapele de proces de fabricație de purificare de spori, de obicei, ultramikrofiltratsiya.

Toxina brut a fost purificat din soluția de cultură prin precipitare acidă ca un complex cristalin care constă dintr-o toxină asociată proteinelor. Complexul cristalin este re-dizolvat într-o soluție care conține clorură de sodiu și albumină serică umană, și se filtrează înainte de vacuum sau uscare prin congelare.

Forme de preparate Botox

producția activă Botox implică bacterii cultivarea, purificarea brută TDB, obținerea produsului clinic ca un complex (sau purificată) neurotoxină și depozitare finală. Pentru comoditate în stocarea medicamentului poate fi formulat ca o pulbere liofilizată care poate fi reconstituită înainte de utilizare cu ser fiziologic sau apă. Forma de dozare poate fi prezentată inițial ca o soluție. Din păcate, Botox dificil să se stabilizeze (adică să poată stoca, atunci când este minimizat reducerea activității biologice).

Produsul finit sau medicament este o combinatie a toxinei, proteinele non-toxice și excipienți. Preparate de diferite companii variază în:

• bacterii tulpina cultivate;
• metode de preparare și purificare a medicamentului;
• concentrația stabilizatorului (albumină);
• prezența aditivilor (lactoză, zaharoză, clorură de sodiu).

Botox si Dysport sunt sterile liofilizat sub formă BT tip A sub formă de pulbere într-un flacon sigilat cu vid. In aceasta forma de Botox este stabil timp de aproximativ 4 ani. De exemplu, un flacon de BOTOX (100 U) conține aproximativ 100 de unități de tip BT A integrat, 0,5 mg de albumină serică umană și 0,9 miligrame de clorură de sodiu.
Alte forme comerciale Botox: Dysport (amestec complex BT de albumină și lactoză sub formă de pulbere); Myobloc (TDB o soluție de tip B, albumină, succinat și clorură de sodiu la pH 5,6).

Condiții de depozitare Preparate pe baza toxina botulinica

Toxina botulinică pierde cu ușurință activitatea

Toxina botulinică - otravă foarte sensibile, care suferă ușor Denaturarea cu pierderea de toxicitate.

In general, activitatea toxinei botulinice (care este un peptidaza intracelular) depinde de conformația spațială (structură). tip BT A detoxifiate la temperaturi de peste 40 ° C (în special într-un mediu alcalin), sub influența diferitelor substanțe chimice, precum și formarea de bule la interfața lichid / aer. De exemplu, alcoolul nu poate fi utilizat pentru reproducere sau piele de curățare formulare, înainte de injectare, deoarece cauzează Denaturarea și neutralizeaza toxina.

Diluarea complexului toxinei la concentrații scăzute utilizate în medicină, duce la detoxifiere rapidă a Botox în absența unui agent de stabilizare. Creștere de soluție Botox conținând mg / ml toxină, la o soluție care conține ng / ml, prezintă dificultăți considerabile din cauza pierderii rapide a toxicității specifice la o astfel de diluție ridicată.

Pentru a stabiliza toxina botulinică folosind proteine ​​animale (albumină serică umană și gelatină). Cu toate acestea, prezența proteinelor în formularea finală prezintă probleme potențiale datorită faptului că anumite virusuri stabile, prioni sau alți agenți infecțioși sau patogeni pot contamina Botox, găsită în mediul de preparare.

Caracteristici de recuperare (de reproducere) medicamente cu Botox

Forma uscată a produsului Botox pot fi recuperate (traduse în formă de soluție injectabilă) diluare cu soluție salină sterilă, fără un conservant (soluție de clorură de sodiu 0,9%).

Toxina este foarte sensibil la stres mecanic, căldură și pH-ul, astfel încât este necesară precauție în timpul diluării, astfel încât să nu provoace încălzirea excesivă sau turbulențe. Deoarece BT denatures cu barbotare sau agitare solvent puternic injectat ușor în flacon. Reconstituita BOTOX este un lichid limpede, incolor, fără solide.

Eficacitatea Botox pot fi reduse cu concentrații scăzute de toxină și prezența substanțelor chimice într-un solvent.

Pentru o mai mare eficacitate clinica, producatorii recomanda ca medicii folosesc un produs pentru o anumită perioadă, după diluția în funcție de marca.

Formulări Condiții de stocare care conțin toxină botulinică

Tabelul 1 prezintă condițiile de depozitare, de licență adoptate în prezent pentru cele trei mari familii de produse.

Tabelul 1. Condiții de depozitare, cu licență pentru diferite mărci de produse BT în regiunile majore ale lumii (date oficiale)

H \ d - un produs nu este disponibil în această regiune.
Inițial Botox a fost depozitat la temperaturi sub -5 ° C, în timp ce Dysport depozitat întotdeauna la 2-8 ° C, Botox-ul este acum acceptat pentru set compozit de condiții de depozitare: sau sub -5 ° C sau la 2-8 ° C, Durata timpului de depozitare pentru Botox si Dysport pana la 3 ani, și, respectiv, 2 ani.

Unele dintre noi formule cu un număr redus de unități, cum ar fi Azzalure® sau Vistabel®, au un termen de valabilitate de „părinți“, adică materii prime.

Stabilitate și condițiile de păstrare după diluarea preparatelor Botox

pregătirea reconstituita nu trebuie să fie congelate. Congelarea poate accelera Denaturarea Botox, reducând considerabil durata de post-injecție. S-a arătat că parțial denaturat din cauza depozitării necorespunzătoare a medicamentului Botox®, va continua să aibă un efect, dar perioada de valabilitate a redus în mod semnificativ. Alte studii au arătat că activitatea redusă a toxinei este redusă în timp, cu toate că după 1 săptămâni de reproducere poate fi salvat aproximativ 50% din activitatea inițială.

Producătorii pot oferi doar informații limitate cu privire la stabilitatea medicamentelor diluate, atât de multe clinicieni efectuat propriile lor de cercetare, în scopul de a crește durata de valabilitate a produsului diluat, sau utilizarea solvenților alternativi. În primul rând, aceste studii au ca scop explorarea posibilității de a păstra efectele clinice pentru o lungă perioadă de timp după diluare.

Principalul risc pentru droguri redus - contaminare microbiană ca proteină bogată mediu (HSA) și este un teren propice pentru dezvoltarea bacteriilor. Cu toate acestea, unele studii indică faptul că activitatea Botox poate persista timp de până la 6 săptămâni atunci când sunt depozitate în frigider.

Tabelul 2. Condițiile de depozitare ale medicamentelor diluate cu licență pentru familii BT produse în diferite regiuni ale lumii