Tulpina Acinetobacter junii 5 microorganisme care au capacitatea de a utiliza hidrocarburi

Utilizare: Microbiologie, în special pentru amestecuri de biodegradare de petrol. REZUMATUL INVENȚIEI izolat o nouă tulpină de Acinetobacter junii 5 microorganisme din probe de sol. Tabelul 1.

Invenția se referă la domeniul de Microbiologie Aplicată, și anume, tulpini de microorganisme capabile să utilizeze hidrocarburi.

posibilitate cunoscută a unui număr de microorganisme dispuse hidrocarburi. În special, în aceste scopuri Aspergillus niger, Aspergillus sp. Candida tropicale, Pseudomonas putida [1 martie] Cea mai cunoscută pentru acest scop tulpinile au produs Ps. putida, formularea „Putidoyl“ a fost obținută pe baza cărora [4] Cu toate acestea, acest preparat nu funcționează eficient pentru toate speciile de hidrocarburi sau amestecuri ale acestora, care determină căutarea mai active în această privință microorganisme.

Sarcina rezolvată în prezenta invenție a fost de a obține o tulpină de bacterii Acinetobacter capabile să utilizeze hidrocarburi.

Această problemă a fost rezolvată prin tulpina Acinetobacter junii da 5.

Tulpina a fost izolat din probe de sol Katanga District regiunii Irkutsk în mediu ce conține hidrocarburi, și au fost selectate pentru capacitatea de a utiliza pentadecanul maxim.

Tulpina a fost crescută la 28 ° C timp de 48 ore într-un mediu nutritiv lichid conținând prot hidrolizatul 10,05 g; 4,95 g de clorură de sodiu; apă distilată până la 1 litru; pH (înainte de autoclavare) 7.1.

Bulionul turbiditatea omogenă și precipitatul fin slab. Consistența bulion vâscos. Când însămânțare în mediu semisolid (0,6% agar) și grosimea unui mediu nutritiv dens (agar 1,5%), creșterea grosimii agar offline. Creșterea coloniilor este observată numai pe suprafața mediului.

Pe suprafața mediu nutritiv solid coloniile au o formă circulară regulată. Diametrul coloanei 2 până la 3 mm. Coloniile netede, convexe, albicioase, înconjurate de un halou transparent de formă neregulată. Marginea coloniilor este netedă, coloniile de îmbătrânire (după 6 zile), devine ondulat.

Pigmentul diffuses în mediu, nr.

Celulele Morfologia Gram celule sunt în formă rotundă. Diametrul celular de 1,2 microni. Flageli și pilii nu sunt. Celulele singulare și diplococci, nemișcat.

Caracteristicile fiziologice ale tulpinii: aerobic, imobil, katalozo-pozitiv, oxidaza negativ, nu se lichefieze gelatină. nu cresc în glucoză, zaharoză, lactoză, maltoză, L-arabinoză, manitol, sorbitol, glicerol, fenilalanină L, citrat de sodiu, L-histidină, dacă este utilizat ca sursă unică de carbon.

Când cultivate pe mediu minimal poate fi folosit ca unică sursă de carbon, metanol, etanol, Tween-80, decan, dodecan, pentadecanul, hexadecan, petrolatum. Acesta este în creștere într-un mediu conținând ampicilină la o concentrație de 100 ug / ml.

Anaerobic test Hugh Leyfsona negativ. Ea nu formează indol, miercuri Klinger nu emite hidrogen sulfurat. Hemoliza pe agar cu sânge nr.

Ea nu nitrat, arginindegidrolazy, decarboxilaza lizină, ornitin decarboxilază, triptofandezaminazy.

Tulpina se poate dezvolta într-un interval de pH de 6,5 9,5. Valoarea optimă a pH 7,2.

interval de temperatură de 20 30 ° C Temperatura optimă de creștere este de 28 o C.

Tulpina nu are proprietăți fixatoare de azot. Nu patogene.

Tulpina este depozitată la temperatura de 4 ° C pe un mediu nutritiv care conține 0,06 0,09% azot total 0,4 suplimentat cu 0,2% agar. de stocare de până la 1 an.

Depozitarea pe termen lung (2 ani sau mai mult) se realizează sub forma unui liofilizat în ampule sigilate. mediu protector la uscare de 5,5% lactoză, 1,7% poliglyukina.

Tulpina a fost crescută la 28 ° C pe un mediu nutritiv timp de 24 de ore sau într-un mediu de însămânțare timp de 72 ore.

Mediul lichid nutritiv: Bulion hidrolizatul șprotul 10,05 g, clorură de sodiu 4,95 g Apă distilată până la pH 1 litru (înainte de autoclavare) 7.1.

Mediul nutritiv dens: șprotul hidrolizată 17,9 g de clorură de sodiu 5,9 g, agar 11,2 g, apă distilată până la pH 1 litru (înainte de autoclavare) 7.2.

medie însămânțare: 1,52 g nitrat de potasiu, fosfat diacid de amoniu 2,95 g fosfat dibazic de potasiu 0,87 g de fosfat diacid de sodiu 1,2 g Clorură de sodiu 0,5 g sulfat de magneziu 0,1 g clorură de calciu 0,025 g extract de drojdie 0,1 g, pentadecanul 0,5% apă distilată, până la pH 1 litru (înainte de autoclavare) 7.0.

Caracteristicile genetice ale tulpinii în selectarea tulpinii nu este expus la agenți mutageni și tehnici de inginerie genetică.

Activitatea a tulpinii este determinată indirect prin apariția turbidității in vitro atunci când este crescută pe un mediu de cultură de semințe după 72 ore de incubare.

In prezent, tulpina este utilizată pentru obținerea unui preparat de componente având proprietăți bioremediere în ceea ce privește produsele petroliere poluarea mediului.

sușa aplicabilitate practică ilustrată prin următoarele exemple.

Când se utilizează medicamentul „Putidoyl“ la o doză de 10 5 celule / ml la 18 ° C, gradul de degradare a fost de 10 zile 53% după 20 de zile - 83% 30 zile 94,2% Exemplul 2.

Într-un balon care conține fosfat de amoniu 0,1%, 0,02% KCI, a adăugat o suspensie de bacterii pe baza concentrației finale a 10 3 celule / ml, și 1% câmp Novolabitovskogo ulei. Amestecul a fost păstrat timp de 30 de zile la 20 ° C Gradul de degradare ulei după 10 zile a fost de 89% după 20 zile - 96,9% după 30 de zile 99,91% După cum se poate observa din experimentele de mai sus, tulpina revendicată este capabilă utilizată eficient ca hidrocarburile individuale și amestecuri ale acestora, într-un interval larg de temperaturi.

literatură
1. YN Karasevich. Baze selectarea microorganismelor, utilizând compuși organici sintetici. Nauka, Moscova, 1982.

2. Biochem. Biophys. Res. Communs, 1977, v. 78, 1, p. 401-410.

3. Agr. Biol. Chem. 1968, v. 32, 8, p. 1033 1039.

4. J. Bacteriol. 1976, v. 125, 3, p. 818.

5. Rezumat determinant al bacteriilor Bergi. Mir, 1980, p. 244.

6. Steynner R. și colab., Microbi lume. Volumul 3, Mir, 1979, p. 142.

7. J. Gen. Microbiol. 1973, v. 74, 1, p. 139148.

Tulpina de microorganism Acinetobacter junii N D „ARRIAM-484“ (o colecție de Institutul de Microbiologie Agricolă) având capacitatea de a utiliza hidrocarburi.