sistem de grup sanguin Rhesus

(. Tabelul 18.3) Cea mai imunogenă cinci antigene de bază sistem de grup sanguin Rh antigen este antigenul D. D România populație prevalență - 86% (procentul de indivizi Rh negativ, respectiv, aproximativ 14%). Imunogenitatea altele (minor) sistem antigen Rh este substanțial mai mică și scade în ordinea următoare: c> E> C> e.

Sistemul imunitar este persoane Rh-negative în contact cu antigenul sintetizând-anticorpi D anti-D, care sunt importante clinic in transfuzie alogenă si sarcina femeilor Rh negativ fetus Rh pozitiv (reacție post-transfuzie, boala hemolitică a nou-născutului și hemolitic, respectiv). În funcție de haplotipul pe membrana eritrocitelor exprimă de obicei molecule 10000-30000 D, iar în unele cazuri chiar mai mult.

Pentru comoditate, antigenul D slab de lucru pe zi immunohematological laboratoare materializări sunt combinate într-un grup D u. a cărui frecvență este de aproximativ 1%. Aceste celule roșii din sânge sunt puțin sau deloc aglutinate complet de anticorpi anti-Rh în aglutinarea directă.

O metodă de determinare a reglementați accesoriilor Rh folosind standardul reactiv universal antirezus Rh0 (D), eșantioanele negative primare au fost investigate în continuare utilizând un reactiv universal standard anti-Rh0 „(DC) și cu un ser standard Rh0- (DCE). Donator Rh negativ considerat al căror sânge nu conține nici una din aceste trei antigene (D, C, e). această metodă este eficace și utilizat pe scară largă înainte de dezvoltarea de kituri de diagnostic bazate pe anticorpi monoclonali.

Receptorii conținând antigenul D u. Ar trebui să fie atribuită Rh negativ și trebuie transfuzat numai de sange Rh negativ, antigen D ca normal poate provoca astfel de persoane răspuns imun.

Persoanele cu antigenul D u sunt clasificate ca donatori Rh-pozitive ca transfuzie sange poate provoca un răspuns imun la primitori-Rhesus negativ, iar în cazul de sensibilizare înainte de antigen D - reacții transfuzionale severe. De aceea, sângele donatorului trebuie să fie atent testate pentru prezența D u.

Rh pacienți Afilierea de sânge stabili prezența sau absența antigenului D. Pentru a evita eroarea de a lua procedura de sânge și determinarea Rh Facilități efectuate de două ori. Determinarea antigenelor minore sistemului Rh este de obicei realizată când este nevoie de mai multe transfuzii, în cazul în care beneficiarul anticorpilor serici la antigenele sistemului rhesus, precum și femeile însărcinate.

Rezultatul determinării de sange Rh-afilierii pacienților înregistrați într-un registru special, iar pe formularul cu data și semnat de către medicul care a efectuat definiția. Acest formular este inserat în istoria medicală cu data și semnătura medicului curant.

donator de sânge Rh Rezultatul afilierii înregistrate într-un registru special și cardul de donator cu data și semnat de către medicul care a efectuat definiția.

METODE Rh ACCESORII SÂNGE

reacția de hemaglutinare într-un plan cu anti-D IgM (anticorp complet) reactiv monoclonal

Determinarea se efectuează în sânge nativ, stabilizat cu conservanți; Sânge fără anticoagulant, în vol. H. Luat din deget. Cea mai clară aglutinare observată atunci când se utilizează concentrații mari de celule roșii din sânge și o temperatură de aproximativ + 37 ° C, de aceea este de dorit să se utilizeze o placă încălzită.

Cursul de determinare:

placa este aplicată cu o cădere mai mare suprafață umectată (aproximativ 0,1 ml) de reactiv;
plasat lângă o mică picătură (0,01-0,05 ml) de sânge examinate;
amestecarea sângelui cu un reactiv cu o baghetă de sticlă;
10-15 pentru a se agită placa timp de 20-30 de secunde;
reacția de aglutinare începe să se dezvolte în 10-15 cu aglutinare krupnolepestkovaya exprimat clar are loc în 30-60 secunde. Rezultatul ar trebui considerat aglutinare după 3 minute ca cu eritrocite care poartă antigenul D u. reacția de aglutinare se produce lent.

Prezența aglutinării indică prezența antigenului în testul eritrocite D (Blood - Rh pozitiv). Absența aglutinării indică faptul că au studiat celulele roșii din sânge nu conțin antigenul D (sânge - Rh negativ). În cazul aglutinare slab face presupunerea prezenței antigenului pe eritrocite fenotip slab D și să efectueze eritrocitele de cercetare în testul antiglobulină indirect (Coombs indirect) utilizând IgG (părinte) anti-D-anticorpi.

imediat după determinarea reacției este înregistrată.

Formele Definiție de antigen D slab (D u) la a doua etapă a studiului conglutination ce reacționează cu gelatina testul in-vitro cu anti-D IgG (anticorp incomplet) reactiv monoclonal

In paralel cu studiul efectuat stadializarea trei probe de control:

a) standard, Rh-pozitive celule roșii din sânge;
b) cu standard negativ celulele roșii din sânge Rh;
c) cu eritrocite de test și soluția de gelatină, dar nici anti-D-anticorpi.

Cursul de determinare:

introdus în tub, o picătură (0,05 ml), eritrocite libere din sângele coagulat sau un cheag de eritrocite, se spală de conservant;
se adaugă 2 picături (0,1 ml), 10% gelatină, încălzită în prealabil la temperatura de 45-50 ° C pentru a lichefia;
se adaugă o picătură de reactiv anti-B;
suspensie agitată;
incubate timp de 10-15 minute într-o baie de apă sau de 30 de minute într-un termostat la 48 ° C;
S-a adăugat 5-6 ml de soluție fiziologică;
răsturnate ușor tub de testare 1 - 2 ori;
vizual (cu ochiul liber sau cu ajutorul unei lupe) a detecta prezența aglutinează.

Aglutinarea celulelor roșii din sânge indică prezența în ele a antigenului D. În cazul unei aglutinare clare a probei de sânge, Rh negativ, conform rezultatelor cercetării cu ajutorul anticorpilor monoclonali anti-D IgM, deducând prezența antigenului D u. În cazul neclare aglutinare cu nisip fin din sânge ar trebui să fie testate în testul antiglobulinic indirect.

In mod similar, împreună cu reactivi monoclonali pot fi utilizate cu standardul aloimună ser incomplet anti-D-anticorpi.

Dacă există determinare inadecvată probe de control rezultă accesorii Rh trebuie repetată utilizând alți reactivi sau proba de gelatină. Când eritrocitare aglutinare investigate gelatina în absența anti-D-anticorpi poate presupune prezența adsorbite pe eritrocite anticorpi eritrocitare anti-Rh sau specificități diferite.

Determinarea antigenele Rh prin reactivi universale

reactiv Standard antirezus Rh0 (D) conține anti-D-anticorp policlonal incomplet. Concomitent cu studiul donatorilor de sânge făcut cercetare standard de referință de celule Rh-pozitive roșii sanguine ale aceluiași grup sau o grupare 0 (I) și standard, celulele Rh negativ roșii din sânge în mod necesar studiu cu un singur grup cu sânge.

Cursul de determinare:

în partea de jos a tubului 1 se face un standard antnrezus picătură reactiv;
adaugă o picătură de sânge examinate (sau celule roșii din sânge);
conținutul tubului amestecat prin turbionare;
rotit încet tubul prin înclinarea aproape la orizontală, astfel încât conținutul curge de-a lungul pereților. O astfel de distribuție de sânge pe pereții tuburilor face ca reacția mai pronunțată;
aglutinare are loc în primul minut, dar formarea unui complex de aglutinare și distinct stabil antigen-anticorp, și, de asemenea, din cauza posibilității de reacție întârziată în prezența antigenului D u. contactarea eritrocitelor cu reactiv trebuie făcută atunci când transformarea într-o cel puțin 3 minute;
pentru excluderea agregarea nespecifică a eritrocitelor într-o eprubetă se adaugă 3,2 ml de soluție fiziologică și se agită fără agitare prin răsturnare a tuburilor de 2-3 ori mai mare;
Evaluarea a fost efectuată vizual.

Prezența aglutinării sub formă de fulgi mari de celule roșii din sânge în fundal de fluid luminat prezintă transfuzii cu sânge Rh-pozitive investigate.

Absența aglutinare (in vitro lichid omogen colorat) - un semn de transfuzii cu sânge Rh negativ investigate.

Rezultatul este considerat ca un adevărat după verificarea probelor de control, adică cu un rezultat pozitiv cu standard, celulele rosii Rh-pozitive și absența aglutinării cu celule standard cu Rh negativ roșii sanguine, studiu cu un singur grup cu sistem sanguin ABO.

testul antiglobulină indirect (testul Coombs indirect) folosind (părinte) anti-D anticorpi

In paralel cu studiul testat probe de sange, monitorizarea studiilor efectuate cu celule roșii sanguine Rh-negativ standard.

Aglutinarea eritrocitelor tratate cu enzime proteolitice, IgG (incomplet) anti-D-anticorpi

Pentru a spori aglutinarea directă a eritrocitelor într-un mediu salin, utilizând proteaze de pretratament eritrocitare (enzime proteolitice). Bromelin, papaynom, tripsina, etc. Acest lucru mărește sensibilitatea metodei, inclusiv în ceea ce privește forma slabă a antigenului D. Metoda este utilizată în sistemele automate, definirea grupelor sânge. O caracteristică a acestui test, ceea ce împiedică utilizarea sa pentru fenotipare rutina de celule sanguine roșii, un fenomen prozonă - exces de inhibare a aglutinării anticorpului. Pentru a evita fenomenul de prozonă este necesară pentru asigurarea stardard enzimelor concentrației eritrocitare și observă anti-D-anticorpi - recomandate de fabricant.

Total pagini: 10