reacția de imunofluorescență (direct-recif, și indirect-RNIF) ca metodă de diagnostic rapid

Metoda imunofluorescenŃă (RIF, reacția de imunofluorescență, reacția Coons) - Metoda specifică a detecta Ar via Am conjugat cu un fluorocrom. Ea are o sensibilitate și specificitate mare.

Este utilizat pentru diagnosticarea rapidă a bolilor infecțioase (identificarea agentului patogen în materialul) și pentru determinarea AT și receptorilor de suprafață a leucocitelor și markeri (imunofenotipare) și colab., Cell.

Detectarea antigenelor virale și bacteriene în materiale infecțioase, țesuturi animale și culturi celulare utilizând anticorp fluorescent (seruri) a fost utilizat pe scară largă în practica de diagnosticare. Prepararea fluorescente seruri bazate pe capacitatea unor fluorocrom (de exemplu, izotiocianat de fluoresceină) pentru a intra într-o legătură chimică cu proteine ​​din zer, fără a perturba specificitatea lor imunologice.

Există trei tipuri de metode: directe, indirecte, pentru a completa. metoda directă RIF bazată pe faptul că antigenele de țesuturi sau bacterii tratate cu anticorpi seruri imune marcate cu fluorocrom, capabile să aprindă razele UV fluorescență microscop. Bacteriile din frotiu, ser tratat cu o strălucire luminescente la periferia celulei sub formă de franjuri verde.

Metoda RIF indirectă este de a identifica antigenul - anticorpi folosind antiglobulină (anti-anticorpi) ser, marcat cu un fluorocrom. În acest scop tampoane microbii de suspensie sunt tratate cu anticorpi anti-microbiene seruri de iepure de diagnostic. Anticorpul, antigene nelegate de microbi sunt spălate, și rămânând anticorpi pentru a detecta microbi prin antiglobulină tratament frotiu (anti-iepure) ser marcat cu fluorocromi. Rezultatul este un complex de anticorpi antimicrobian anticorp microb + iepure + anti-iepure etichetate cu un fluorocrom. Acest complex a fost observată la microscop cu fluorescență, la fel ca în metoda directă.

Mecanismul. La prepararea unui diapozitiv frotiu din materialul probei, este fixat pe conținând anticorpul tratat cu flacără și ser de iepure imun impotriva antigenilor patogeni. Pentru formarea antigenului - preparat de anticorpi a fost plasat într-o cameră umedă și se incubează la 37 ° C timp de 15 minute, apoi se spală bine cu soluție de clorură de sodiu izotonică pentru a îndepărta anticorpii nelegați antigen. Apoi, medicamentul este aplicat pe un iepure fluorescent ser antiglobulină globulină, se lasă să stea timp de 15 minute la 37 ° C, iar apoi preparatul este spălat bine cu o soluție izotonică de clorură de sodiu. Ca rezultat al serului de legare antiglobulină fluorescent fixat la anti-organismele antigen-specifice sunt formate complecși luminescente de antigen - anticorp poate fi detectată prin microscopie fluorescentă.

4. pepiniere Dormitorul copilului de aer a găsit 75 mt / m3 streptococ, 12 mt / m3 aureus și 1 mt / m3 bacililor tuberculoși. Postează o evaluare sanitar-bacteriologică a aerului și să contureze planul său de reorganizare.

bilet de examinare № _54

Retrovirusurile. infecției cu HIV (SIDA) și agenții săi cauzali.

virusul imunodeficienței umane care cauzeaza infectia cu HIV, care se încheie dezvoltarea de sindromul imunodeficienței dobândite.

Agentul cauzal al infecției cu HIV - virusul limfotropic aparținând familiei de genul Retrovirusuri lentuvirusuri.

Caracteristici morfologice: un virus ARN. Viral forma particulelor înveliș sferic constă dintr-un strat dublu de lipide, glicoproteine ​​penetrat. Plicul lipidic derivat din membrana plasmatică a celulei gazdă în care reproduce virusul. molecula glicoproteina este compusă din două subunități, pe suprafața virionului și membranele lipidice sale penetrante.

Forma Virus core con, este format din proteine ​​ale capsidei unui anumit număr de proteine ​​ale matricei si proteine ​​proteaze. Genomul formează două catene de ARN pentru procesul de reproducere a revers transcriptazei HIV sau revers transcriptaza.

Genomul virusului este format din trei gene structurale majore si de reglementare 7 și gene funcționale. gene funcționale îndeplini funcțiile de reglementare și asigură punerea în aplicare a proceselor de reproducere și de a participa la procesul infecțios virale.

Virusul afectează în principal T și B-limfocite, unele celule ale seriei monocitare (macrofage, celule albe din sange), celule ale sistemului nervos.

Proprietățile culturale: culturi celulare de limfocite T și monocite umane (în prezența IL-2).

Structura antigenică: virus de tip 2 - HIV-1 și HIV-2, HIV-1, are mai mult de 10 genotipuri (subtipuri): A, B, C, D, E, F ..., care diferă în compoziția de aminoacizi a proteinelor.

HIV-1 sunt împărțite în trei grupe: M, N, O. Majoritatea izolează se referă la grupa M, unde 10 este izolat subtipuri: A, B, C, D, Fl, F-2, G, H, I, K Stabilitate : sensibil la factorii fizici și chimici, moare în încălzire. Virusul poate persista o lungă perioadă de timp într-o stare uscată în sânge uscat.

Factori patogenitate patogenia: Virusul se atașează la limfocite, intră în celulă și reproduce în limfocite. Ca urmare a reproducerii HIV în limfocite colaps recent sau își pierd proprietățile lor funcționale. Ca rezultat, multiplicarea virusului într-o varietate de celule este acumularea sa în organe și țesuturi, și se găsește în sânge, limfă, salivă, urină, sudoare, fecale.

Când infecția HIV se reduce numărul de limfocite T-4 funcția limfocitelor B perturbate, inhibă funcția celulelor killer naturale și răspunsul la antigeni este redus și produse de complement, limfokine și alți factori de reglare funcții imune (IL) perturbat, prin aceasta vine o disfuncție a sistemului imun sistem.

Clinic: afecteaza sistemul respirator (pneumonie, bronșită); SNC (abcese, meningita); Gastro-intestinale (diaree), există neoplasme maligne (tumori ale organelor interne).

infecției cu HIV are loc în mai multe etape: 1) perioada de incubație, cu o medie de 2-4 săptămâni; 2) o etapă de manifestări primare caracterizate mai întâi prin febră acută, diaree; Faza de asimptomatică pas este finalizat, iar persistența virusului, restabilirea sănătății, cu toate acestea sunt definite anticorpii HIV în sânge, 3) o etapă de boli secundare manifestate leziuni respiratorii ale sistemului nervos. Hung cu HIV ultima, a 4-stadiey- terminal de SIDA.

Virusologice și studii serologice includ metode de determinare a antigenelor HIV si anticorpi. În acest scop, ELISA, PCR, și IB. Serurile pacienților cu HIV-1 și HIV-2 conțin anticorpi la toate proteinele virale. Cu toate acestea, pentru a confirma diagnosticul detecta anticorpii la gp41 proteine, gpl20, gpl60, p24 HIV-1 și a anticorpilor la proteinele gp36, gpl05, gpl40 HIV-2. anticorpii HIV apar 2-4 săptămâni după infecție și determinată în toate stadiile HIV.

Metoda de detecție a virusului în limfocitele sanguine. Cu toate acestea, pentru orice probă pozitivă pentru a confirma rezultatele plasat reacția IB. PCR a fost de asemenea folosit, capabile de a detecta infecția HIV în perioada de incubație și la începutul clinice, dar sensibilitatea sa este ceva mai mic decât IFA.

Diagnosticul clinic și serologic este confirmat prin studii imunologice, în cazul în care indică prezența imunodeficientei la pacient supus examinării.

Sistemul de diagnosticare de testare immunoassay pentru detectarea anticorpilor la HIV - virusul include AH adsorbit pe un purtător, anticorpi împotriva Ig uman. Folosit pentru serodiagnosis de SIDA.

Tratament: utilizarea inhibitorilor revers transcriptazei care acționează în celule activate. Formulările sunt derivați de timidină - azidotimidina și phosphazide.

Prevenirea. Specifice - nr.

Influența factorilor fizici și chimici asupra microbilor. Mutația și importanța sa pentru medicina practică. Exemple. Valoarea mediului.

Acțiunea factorilor chimici și biologici.

Produse chimice de acțiune

Chemicals poate inhiba sau suprima complet creșterea microorganismelor. Dacă o substanță chimică inhibă creșterea bacteriilor, dar după îndepărtarea lor de creștere a fost reluată din nou.

Agenții antimicrobieni în vederea structurii chimice și mecanismul efectului lor bactericid asupra bacteriilor pot fi împărțite în următoarele grupe: oxidantă halogeni, compuși metalici, acizi și baze, surfactanți, alcooli, coloranți, derivați de fenol și formaldehidă.

Oxidanti. Acest grup include peroxid de hidrogen și permanganat de potasiu.

Halogenii. Clor, iod și preparatele lor: var clorurate, cloramină B, pantotsid, soluție alcoolică de iod 5%, iodinol, Iodoform.

Compușii de metale grele (săruri de plumb, cupru, zinc, argint, mercur, compuși de argint organometalici: Protargolum, argint coloid). Acești compuși sunt capabili să furnizeze atât efect local și antimicrobian Diverse asupra tesutului gazda.

Acizi și baze. Baza acțiunii bactericide a acizilor si alcali sunt microorganisme deshidratare, schimbarea pH-ului mediului nutritiv, hidroliza sistemelor coloidale și formarea albuminați acide sau alcaline.

Coloranții au proprietăți de a întârzia creșterea bacteriilor. Ele sunt lente, dar mai selectiv.

Formaldehida, un gaz incolor. În practică, utilizează o soluție de formaldehidă apoasă 40% (formalină). Și formaldehidă gazoasă dizolvat în apă este un efect dăunător asupra vegetative și spori forme de bacterii.

Acțiunea factorilor biologici

Factorii biologici de acțiune se manifestă în primul rând microbi antagonice, atunci când produsele reziduale ale unor microbi cauzează moartea altora.

Antibiotice (de anti greacă -. V., Bios - viață) - substanțe bioactive formate în timpul vieții de ciuperci, bacterii, animale, plante, și prin sinteză mijloace capabile să selectiv suprima și ucide bacteriile, ciupercile, Rickettsia, virusurile mari, protozoare și unii viermi.

3. Reacția activității biologice a reumatismului enzimelor bacteriene, importanță diagnostică și practică, rolul protector al anticorpilor împotriva enzimelor în imunitatea dobândită (antigialuronidazy determinare și anti-streptolizinei O).

febra reumatica - o boală infecțioasă comună de natură alergică, care afectează țesutul conjunctiv, în principal, a sistemului cardiovascular, precum articulațiile, organele interne, sistemul nervos central. Se crede că cauza reumatismului este activarea microorganismelor patogene, în special beta-hemolitic grup streptococ A. Că el joacă rolul principal în etiologia și patogeneza bolii reumatice. În primul rând, boala se dezvoltă în fundal de infecție streptococică. În al doilea rând, în sângele pacienților a relevat un număr mare de anticorpi pentru microorganismele din grup. În al treilea rând, prevenirea bolii se realizează cu succes cu medicamente antibacteriene.

In artrita reumatoida, membranele sinoviale, din motive neclare, secreta cantitati mari de glucoza enzima dehidrogenază 6-fosfat care descompune, de asemenea, legăturile disulfidice în membrana celulară. În același timp, există o „scurgere“ de enzime proteolitice din lizozomii celulelor, care provoacă daune la nivelul osului din jur și cartilajul. Organismul răspunde la acest lucru prin producerea de citokine, printre care există, de asemenea, factorul de necroză tumorală # 945; TNF-a # 945;. Caile in celulele care sunt declanșate de citokine, agrava și mai mult simptomele bolii. inflamație reumatoidă cronică asociată cu TNF-a # 945;, de foarte multe ori provoacă leziuni la nivelul cartilajului și a articulațiilor, ceea ce duce la handicap fizic.