instructiuni metodice pe studii de laborator pe animale piroplasmoses

prin teste de laborator pe

1. Dispoziții generale

1.1. 1.1. Piroplasmoses (babesioza, theileriasis) - boala protozoare a animalelor cauzate de patogeni Piroplasmida detașare. Patogenii piroplasmoses au specificitate de specie.

Babebioz cauza: cai Babesia caballs (piroplasma caballi), b. equi (equi nuttallia); vite - V.bovis (fransaiella colchica), b.bigemina (p.bigeminum), b.divergens (b bovis.); oi și capre - b.ovis, b.motasi (p.ovis); câini - b.canis (p.canis).

Theileriasis cauza: bovine -theilezia annulata și th.sergenti; ovine și caprine - lea. Ovis.

Boala este acută, subacută, cronică și însoțite de febră, anemie, hemoragie și zheltushnostyo pe membranele mucoase, hemoglobinurie (la babesioza), limfadenopatie (la theileriosis) și se termină adesea cu moartea.

1.2.Diagnoz piroplasmoses pentru a pune pe baza epizootică, date clinice, patologice si examenul microscopic.

1.3. Studiile de laborator pe piroplazmidoay includ: microscopie frotiu de sânge, organe interne, creierul, ganglionii limfatici punctiformă; diferențierea agenților patogeni.

2. Prelevarea de probe și transportul de material pentru studiu.

2.1. În laboratorul de cercetare dirijate de la suspectate boala sau animale bolnave - frotiuri subțiri ale vaselor sanguine periferice ale urechii, coadă sau corolă, pe lângă theileriasis - punctates frotiurile din ganglionii limfatici; din morți sau uciși - o parte din ficat, plămâni, splină, rinichi, creier și ganglionii limfatici hepatită.

2.2. frotiurilor de sânge prelevate în timpul dezvoltării simptomelor bolii, la o temperatură ridicată, înainte de aplicarea unui tratament specific.

2.2. Înainte de selectarea materialului în păr animal la fața locului, se taie o trage de sange, pielea este atent șters la începutul unui tampon de vată înmuiat în alcool și apă și apoi uscat. ac steril face venipunctură Pinna sau foarfece crestat marginea de sus a urechii sau coada. Prin cădere liberă a proeminenței de sânge ușor este degresat suprafața atingere a slide-ului. Sticla este apoi rândul său, rapid meniurile și să păstreze degetele de la mâna stângă într-o poziție orizontală. margine de lustruit sau un alt obiect pentru a atinge acoperite cu sticlă o picătură de sânge. Odată ce sângele este distribuit uniform de-a lungul marginii geamului, se realizează rapid pe suprafața de sticlă de la dreapta la stânga, la un unghi de 45 °. Lățimea cursei să fie mai lung de diapozitive. Pentru fiecare nou frotiu de a lua o picătură de sânge proaspăt. De la fiecare animal este pregătit pentru 2 timpi.

frotiuri gata de sânge uscat în aer; să le usuce peste o flacără sau soarele nu se poate. Pe vreme rece, face accident vascular cerebral într-o cameră caldă sau pe sticla, se încălzește pe capacul sterilizatorului.

frotiu de sânge pregătite corespunzător ar trebui să fie subțire, uniform, și o lungime suficientă pentru a pune capăt de 0,5-1,0 cm de marginea sticlei.

2.4.Pri luând puncția ganglionilor limfatici animal este bine fixat pe locul puncției taie un fir de păr, pielea este frecat cu un tampon de vată înmuiat într-o soluție de alcool sau tinctura de iod. Cu mâna stângă a tras nodul limfatic și să păstreze degetul mare și arătător de mâna stângă. Este apoi adânc în ansamblu ac steril este introdus, acesta este pus pe pistonul seringii este aspirat și limfatic. După este detașat seringa, acul este îndepărtat, iar conținutul pistonului seringii este extrudat pe

o lamă de sticlă, făcând lovituri subțiri, care sunt uscate cu aer.

2.5. Pe frotiul de sange uscat si punctie cu un obiect ascuțit sau un număr simplu creion scris, tipul de animal și data preparatului frotiu.

2.6. Materialul de la animale moarte sau sacrificate sunt luate înainte de debutul rigor mortis.

2.7. Tampoanele sunt ambalate în hârtie obișnuită, materialul patologic - recipiente rezistente la umezeala și transportate la laborator în ziua de prelevare.

3. Examen microscopic

3.1. De livrat pentru studiul materialului patologic pentru a face 2 timpi fiecărui obiect.

3.1.1. Frotiuri ale creierului sunt preparate prin încheierea unor bucăți mici între slide-uri. Triturarea plasat materialul reteza ele de sticlă în direcții opuse în direcție orizontală, producând astfel două frotiu destul de subțire. Frotiuri au fost uscate în aer.

3.1.2. Parenchimatoase organe pregătesc frotiuri. Pentru a face acest lucru, se taie un corp bisturiu ascuțit cu forcepsul și apuca o bucată de suprafața liberă de o bucată de sticlă pentru a face câteva imprimeuri subtile, pete uscate cu aer.

3.2. Frotiurile fix alcool etilic 96 ° - NYM timp de 20 -25 minute. sau un amestec de etanol și eter, în cantități egale - 10-15 minute.

După uscare frotiuri colorate cu azurie - eozină Romanowsky-Giemsa (colorant diluat cu pH apă distilată 7,0-7,2 - 1:10) - 30-45 minute. (În funcție de calitatea cernelii și temperatura camerei), se spală cu apă distilată, pH 7,0-7,2 până la dispariția urmelor de vopsea pe hârtie de filtru, se usucă și se examinează sub un microscop sistem de imersie (X90). Calitatea frotiu culorii este determinată sub un microscop prin colorarea leucocitelor. În cazul în care leucocitele palid colorate sau nu pătate, explora medicamentul este inutil, este necesar să se aplice o serie de cerneală diferită.

3.3. Cand microscopie babezii detectate în eritrocite, iar teilerii B.ekvi - chiar și în celulele țesutului limfoid sub formă de forme diferite schizonți. piroplazmid citoplasmatice vopsite în culoare albastru-albăstrui, tufe de cromatinei - roșu purpuriu sau roșu.

4. Diagnosticul diferențial al agenților patogeni și evaluarea rezultatelor.

4.1. Piroplazmid diferențiază între ele (în legăturile sub formă de colț de forme asociate, raportul dintre mărimea și raza eritrocitare în localizarea eritrocit lor), precum și

Anaplasma și eperitrozoon. Pentru a determina utilizarea tabelul de mai jos:

4.2. Rezultatul studiului este considerat pozitiv atunci când detectează în prepararea agenților patogeni materiile prime piroplasmoses.

5. Termenul de examinare microscopică până la 2 zile.

instructiuni metodice pe studii de laborator pe animale sunt dezvoltate piroplasmoses Vserumynskogo Institutul de Medicina Veterinara si experimentale de cercetare centrală și producția de laboratoare veterinare.

la „Ghidul pentru testele de laborator efectuate pe animale piroplasmoses“

Piroplasmoses - boala protozoare a animalelor cauzate de agenți patogeni Piroplasmida echipa. Piroplazmidy - protozoar unicelular cu structura și ciclul de viață complex. Agenții cauzali sunt paraziți de vertebrate și căpușelor; multiplica piroplazmidy la început în eritrocite și celulele sistemului limfatic (Theiler, Babesia ekvi), dezvoltarea agenților patogeni în acarienilor transporter ciclului de corp nu este pe deplin decriptat.

O trăsătură caracteristică a agenților patogeni piroplasmoses este specificitatea lor pentru anumite furci gazde.

Boala se manifestă, în cazul în care există vederi ale căpușelor-transferul patogen relevant infectate, paravitonositeli și animalele sensibile. Boala sezonului animal coincide cu perioada de active, acarienilor de fază purtătoare, care reprezintă una dintre legăturile cheie din lanțul epizootica. In vivo piroplasmoses apar numai ca rezultat al vizualizare infectate parasitism vector căpușe corespunzătoare. Prin urmare, schimbul reciproc între agenții cu sânge cald gazdă și rezultatele vectoriale căpușelor în persistența agenților patogeni în focarele piroplazmidoznyh. În întreaga țară, există 6 genuri

acarieni care trăiesc în condiții specifice de microclimat.

Germenului cauzal intră animalele corpului sensibile cu saliva tic-purtător în timpul hrănirii pe un animal.

Reproducere patogenilor babesioza in corpul animal sensibil apare în capilarele viscerelor eritrocite, în eritrocite, atunci fluxul sanguin. Paraziții sunt alimentate de eritrocite prin osmoza. Secretata de paraziți produși intermediari în metabolismul cauzează disfuncții ale sângelui, circulația sângelui, există congestie în circulația pulmonară, scurtarea respirației, pe baza stagnării are loc activitatea tulburare a organelor interne, metabolismul se produce porozitatea peretelui vascular și apar hemoragii mucoase, membrane seroase , în organele interne; tulburare a inimii și a altor organe de multe ori duce la edem pulmonar, apoi la moartea animalului. Când theileriosis excitatoare prins în organismul animal multiplică mai întâi în ganglionii limfatici, mai târziu în organele parenchimatoase și este introdus în eritrocite.

Primele simptome apar de 8-12 zile de la atacul de căpușe infectate. La animale, notează temperatura ridicată, depresie, pierderea poftei de mâncare, anemie, de multe ori tenta gălbuie; cu Babesioza - hemoglobinuria, disfuncție cardiacă, tractul gastrointestinal și alte organe însărcinate cu compoziția morfologică a sângelui. durata bolii de 1-3 săptămâni. În cazul în care animalele au scăzut, în perioada de convalescență este lent. Mortalitatea de creștere și importate

vite la theileriasis mai mari decât cu babesioza. animalele bolnave sunt purtătoare de agenți patogeni de ani și în această perioadă, ele sunt imune la re-infecția cu același nume agentul de la un raport anual l-ați contactat.

La autopsie găsi de multe ori hemoragiilor țesut îngălbenire pe membranele seroase și mucoase, și în mușchiul cardiac. ganglionii limfatici, splina a crescut, cu sângerare, ficat mărit, vezica biliara destinsa, vezica este umplut cu culoare urină roșiatică (cu babesioza), în membranele mucoase ale cheagului, uneori intestinului, sunt ulcere (la theileriasis).