de lucru 4

Echipament: microscop, aparat de fotografiat Goryaeva, pipetă, gemometra capilare de la Sali, tubul cu un capac de cauciuc.

Reactivi: lichid Türk (100 ml de 5% acetic r-ra la tine și 1 ml de 1% p-ra gențiană violet sau albastru de metilen), ulei de imersie alcool.

Bagaje Goryaeva - sticlă diapozitiv gros cu patru caneluri în partea de mijloc, între care există trei zone înguste, media pe care partea inferioară de 0,1 mm și este bisected un canal transversal. Pe ambele părți ale acestei caneluri situate grilă depus pe sticlă. Goryaeva grilă este format din 225 de pătrate mari, dintre care 25 sunt aliniate de linii verticale și orizontale pe cele 16 pătrate mici. conta leucocitară este efectuată în Goryaeva cameră de numărare sub un microscop la o mărire de 100 de mici pătrate nerazgraflennyh mari. Mare pătrat 16 este mic, ceea ce corespunde la 100 x 16 = 1600 pătrate mici. Unitatea de referință este un pătrat mic. Partea sa este de 1/20 mm, zona 1/20 * 1/20 = 1/400 mm 2. Volumul de sânge este plasat peste un pătrat mic, este de 1/400 mm 2 * 1/10 mm = 1/4000 mm 3 (1 / 10 mm - înălțimea stratului de sânge). de 225 pătrate mari

Progresul. Capac de sticlă pentru camera pisa Goryaeva înaintea inelelor curcubeu.

Setați amplificarea unui microscop la 280 de ori (lentile 7 ocularului 40). Puneți camera pe scena microscop, găsiți ochiurile luate în considerare.

Se pipetează 0,4 ml Türk ia fluid (soluție 5% de acid acetic, se colorează cu albastru de metilen) și se toarnă într-un tub de testare.

Se colectează de sânge din gemometra capilare Sali la semn (0,02 ml); bumbac șterge vârful tubului capilar; tub capilar inferior lichid Türk; lovitură de sânge în tub; se clătește capilar suflare de două ori soluția diluant. Tubul a fost închis cu un dop de cauciuc, se amestecă conținutul. Dial conținutul tubului capilarului. O picătură a plăcii cu eliberare medie capilară sub o lamelă de sticlă cu dop de camera Goryaev (bule de aer nu trebuie să ajungă sub sticla de acoperire). Lasă pe timp de 1 minut. să se stabilească celule sanguine.

Contoriza numărul de leucocite în pătrate mari 100 (sau 1600 pătrate mici). Să ia în considerare celulele din interiorul fiecare pătrat mic, pe laturile din stânga și de sus a fiecărui pătrat. Nu cred că pe laturile de jos și din dreapta ale pătrat, ca numărul lor este luată în considerare la calcularea următoare pătrat de globule albe.

A - numărul de leucocite în marile piețe 100,

4000 - coeficientul pentru a aduce volumul la 1 3 mm (1/4000 mm 3 - volumul de un pătrat mic)

raportul de diluare a volumului sanguin 0,02 ml - 20

1600 - numărul de pătrate mici.

În practică pentru obținerea conținutului real în 1 l de leucocite din sânge obținute suficient la numărarea numărului de împărțit în jumătate și atribut 2 zero (sau numărul numărate de celule roșii din sânge, împărțit la 50), metoda de eroare este de ± 7%.

De exemplu, se estimează 160 de leucocite în unități absolute apoi obține 8000 celule în 1 litru de sânge. Pentru a converti numărul de celule în 1 l (unități SI) necesare pentru a se multiplica rezultatul cu 10 6 adică 000 * 10 8 6 = 9 * 10 9 / l.

Efectuarea de lucru. Înregistrarea secvență de schiță sau celule cont în camera Goryaev. Se calculează numărul de celule pentru a înregistra.

Lucrul 5. Prepararea frotiu de sânge. Colorarea Romanovsky-Giemsa

Hardware: subiect degresată și măcinarea sticlă, lână, pensete, 10 ml pipeta, ochi tăvi cu pipeta de dimensiuni diapozitiv creion.

Reactivi: pește de sânge, 70% alcool etilic,

Metoda se bazează pe abilitatea amestecului de bază (azuriu II) și coloranți acizi (solubile galben eozină apă) elemente de celule sanguine pete în diferite culori și nuanțe. educație acidophilus Okrashivatsya în diferite nuanțe de roșu, bazofile - în culori variind de la violet la albastru.

Progresul. slide-uri degresate

placă de sticlă culisantă pentru a ține în mâna stângă între degetul mare și arătător de margini scurte.

O picătură de sânge (cu o granulometrie de mei), aplicat la capătul din dreapta al geamului (o lamă de sticlă, unghiul de pipetă de sticlă de măcinare). Picătură ar trebui să aibă astfel de dimensiuni încât la sfârșitul cursei, preparate din acestea nu au ajuns la 1 cm în sus marginea de sticlă.