Apertura numerică a microscopului - Reference chimistului 21
Pentru aplicațiile noastre valoare microscopului X este constantă, deoarece obiectele sunt investigate la lumină normală (X = 0,55 microni). Prin urmare, limita de puterea de rezoluție depinde exclusiv de posibilitatea de a crește numeric de deschidere A. [C.10]
Diafragma numerică și propria mărire sunt principalele caracteristici ale lentilelor asociate acestora la distanță și amploarea câmpului vizual de lucru. La suficient de lentile de mare mărire de rezolvat detalii foarte fine, dar ele sunt prea strâns aranjate în planul focal posterior. în cazul în care există o imagine primara. De aceea, prima imagine să fie mărită, astfel încât rezolvarea (percepe) capacitatea aparatului de înregistrare (ochi, și așa mai departe filmul. P.) ar putea fi utilizate în totalitate. Această funcție de n-opera Leznov mai mari ocularele, combinația-ryh a cristalinului și forme, în sine, microscop. [C.239]
Lentilele sunt sistem multi-parte, montat într-un tub metalic. deasupra, care are un filet pentru înșurubare în microscop tub. Pe marginea fiecărei lentile aplicate pentru a crește valoarea proprie, și apertura numerică. Obiectiv cu zoom este egal cu raportul dintre lungimea tubului la lungimea focală a obiectivului. Lungimea standard a tubului de 160 mm. Numirea ca un sistem optic de lentile - formarea unei imagini reale a obiectului. care este considerat vizual prin ocular. Lentile de a oferi imagini de mari dimensiuni. [C.30]
Partea principală a -obektivy microscop și ocularelor. Lentila este format dintr-un număr de lentile conținute în cadru special. Pe marginea are un filet cu care obiectivul este conectat la priza din turela. Inscripționat pe marginea cifrelor care arată o creștere a propriei lentile și apertură numerică (vezi. P. 28). [C.26]
Așa-numita numeric (sau numeric) apertură a obiectivului microscopului (N. A.) este egală cu produsul dintre sinusul unghiului a, care formează fasciculul mai oblic încă intră lentila microscop. cu axa optică a microscopului. prin indicele de refracție al mediului. în care obiectul [c.203]
Unul dintre avantajele microscopie cu contrast de fază înainte de întuneric-câmp, care este utilizat în prezent mai puțin frecvent este utilizarea completă a diafragmei, ceea ce implică necesitatea de a utiliza cea mai înaltă calitate lentile de contrast de fază. Aceasta, la rândul său, necesită utilizarea unui condensator cu o deschidere suficient de mare și, la fel ca înainte, aplicarea compensatorii ocularelor 15x creștere sau chiar 20X, capabil să realizeze de înaltă rezoluție. care dă lentilele. Acesta este disponibil în contrast de fază lentile de imersiune putere medie (40X-Boch), care oferă o imagine completă bine definită, atunci când se ocupă cu miceliu de ciuperci și alte celule mari. Cele mai bune rezultate sunt obținute. folosind lentile cu 90X și crește YuOh și o deschidere numerică mai mare de 1,0, folosind imersiunea. Cu toate acestea, rezultate satisfăcătoare sunt în fază randamente microscopie de contrast și fără utilizarea imersiunea, de exemplu atunci când numărarea bacteriilor. protozoare și spori, mobilitatea controlului sau în determinarea mărimii și formei. În acest caz, atunci când doresc să vadă organizarea intracelulară detaliată a organismelor vii. ar trebui să acorde o atenție la proprietățile de refracție ale mediului. care discută cele mai bune rezultate sunt obținute cu celule în mediu adăugând gelatină până la 15-30%. In acest caz, indicele de refracție și cifrele conținutul intracelulare sunt identice sau aproape identice, iar defazajul este proporțională cu indicele de refracție. înmulțită cu calea luminii. și reflexii sunt reduse în aceste condiții. [C.23]
Rezoluția (H) este cea mai scurtă distanță dintre puncte în detaliile produsului care încă nu au fuzionat în imaginea văzută printr-un microscop, sau o fotografie. K = R / 2 (h la ..), unde X -. Wavelength luminii aplicate, precum h. - deschidere numerică - o măsură a capacității de lentile de colectare a luminii. Pentru cele mai mici valori ale K ar trebui să fie utilizate lumină de scurtă lungime de undă. deși, din păcate, lumina cea mai eficientă a spectrului (lumina ultravioletă și anume în 365 nm) nu este percepută de ochi și nu trece prin sticla. Pentru a profita de lumina ultra-violete. de exemplu, în cazul microscopie cu fluorescență. nevoie sunt necesare sisteme optice de cuarț sau fluorină (fluorit) și metode indirecte de observație. Nai cele mai bune rezultate cu lumină vizibilă produs în regiunea VC-verde a spectrului. ca aberații ale obiectivului sunt minimizate tocmai pentru această regiune lungime de undă. În ceea ce privește rezoluția, acest domeniu, cu toate acestea, este o lungime de undă relativ lung. [C.24]
Condensatorul microscop are, de asemenea, o anumită deschidere numerică de 1,2 1.4. lentile Vysokoaperturnye se combină atunci când se lucrează cu condensatoare vysokoaperturnymi. În cazul în care deschiderea lentilei condensatorului este mai mică decât diafragma, capacitățile de lentile nu sunt pe deplin eliberate. [C.10]
Respectivul procedeu a fost efectuat pentru fiecare dintre cele două lungimi de undă (5770 și 5461 A) și pentru două lungimi (14,5 și 25,4 mm) din fibre cu diametrul de bază 2 și 50 de microni. Localizarea relativă a sursei, modulatorul, reschetki, condensator, diafragma de admisie și lentile diafragma în toate experimentele a fost constant schimbat doar concentrandu-se (spre în câteva micrometri) a obiectivului microscopului și poziția diametrului diafragmei de 50 microni pentru a centra imaginea pe fibra. Deoarece apertura numerică a sursei de lumină (0,95) a fost semnificativ mai mare decât cea a fibrei (0,136), a fost imposibil de a elimina semnalul de excitație în coajă. Totuși, diametrul diafragmei 1,1 mm, plasat în fața unui fotomultiplicator, elimină o mare parte din semnalul de plic (numai 1/10 din aria cochiliei 000 este reprezentată pe fotomultiplicatorul). [C.231]
Microscopul este format din două părți - optice și mecanice (Figura 4.). Pentru optica minuțioase sunt lentile care constau din față (de jos), lentila de mărire un obiect, iar lentila de corecție corectarea defectelor de imagine optice. Lentilele sunt împărțite în imersiune uscată și (de la shtegvyu - imersiune). Microscoapele MBR-1 și IBI-1 doua lentilă uscată și una imersiune. Datele pentru fiecare lentilă este pe X8 sale jantă 1), 40, 90, 2) apertură numerică 3) numărul de serie. Nfyadu cu aceste lentile denumiri de imersie 90 au un indice de scrisoare suplimentară MI sau RI (lentile de imersie sau o imersie în ulei), precum și o linie neagră de marcare din partea de jos a lentilei. [C.11]
Orice obiectiv cu diafragma numerică, se invecineaza cu aerul nu poate fi mai mare de 1, astfel încât la un indice de refracție al aerului este 1, iar unghiul (vezi. Fig. 44) nu poate fi mai mare de 90 ° (adică. E. Sinu l). Microscopul MBR-1 40X obiectivul are o deschidere [c.84]
Diafragma numerică a obiectivului este indicată pe jantă. Lentila microscop IDB = 18X și 40X apepturu sunt, respectiv, 0,20 și 0,65. In lentila de imersie în ulei cu creșterea 90X în deschiderea de 1,25. [C.85]
Diafragma condensatorului trebuie să se potrivească cu deschiderea numerică a cristalinului. Atunci când este mai mică decât deschiderea lentilei, caracteristicile optice ale celor mai recente lentile nu sunt pe deplin utilizate datorită slăbiciunii care se încadrează în ea lumina. În cazul în care deschiderea lentilei condensatorului mai mare deschidere (care, în special, cazul atunci când se lucrează cu sisteme uscate), aveți nevoie pentru a acoperi câteva dintre irisului condensatorului. Acest lucru va conduce la eliminarea luminii dispersate și a da contrastul dorit al imaginii (fig. 46). condensator microscop Neimmergirovanny [c.85]
Luminozitatea de iluminat trebuie să fie reglată numai prin schimbarea dispozitivului de fixare a lămpii cu incandescență sau cu ajutorul filtrelor. Poziția oglinzii și iluminatorul diafragmei condensatorului nici o schimbare nu ar trebui să se mai ridice și coborâți condensatorul sau utilizarea nerațională a irisului sale pentru a regla luminozitatea câmpului vizual. deoarece acest lucru reduce rezoluția microscopului. Se degradează imaginea poate chiar distorsiona. condensator de diafragmă este folosit doar pentru a schimba contrastul imaginii. Necesitatea de a utiliza un condensator cu diafragmă eliminate dacă pre-alinia diafragma cu deschiderea lentilei condensatorului utilizat. După cum sa menționat, diafragma neimmergirovannogo condensatorul aproape de 1, iar deschiderea numerică a obiectivului 40X este [c.87]
Pentru aplicațiile noastre valoare microscopului X este constantă, deoarece obiectele sunt investigate la lumină normală (X = 0,55 microni). Prin urmare, limita de puterea de rezoluție depinde exclusiv de posibilitatea de a crește apertură numerică. Apertura numerică a lentilei caracterizează svetosobiratelnuga capacității sale și este determinată prin formula [c.7]
Pentru obiect convențional microscopie osvephepie trebuie să îndeplinească două condiții, în primul rând, fasciculul de lumină ar trebui să aibă o divergență a fasciculului, la ieșirea din planul obiect nu este mai mică decât unghiul de 7, pentru a putea utiliza în totalitate puterea de rezoluție a unui obiectiv (cum se spune specialiști în domeniul microscopiei, fasciculul de raze incidente trebuie umple deschiderea numerică a cristalinului), și în al doilea rând, iluminarea probei să fie uniform pe toată suprafața sa, și pentru comoditate, au nevoie de capacitatea de a controla intensitatea razelor împrăștiate și screening-ul. Pentru a realiza aceasta din urmă este utilizat sursă de lumină mică. lumina de care este axat pe o zonă foarte mică, prin utilizarea unui sistem de lentile, montat împreună și numit un condensator, care acționează ca o lentilă, un fascicul de lumină de mers înapoi. Aberația a condensatorului, de regulă, nu se ajustează la fel de bine ca și în cazul lentilei, deoarece capacitatea de rezoluție a lentilelor este aproape independentă de aberații mici ale condensatorului. Există trei tipuri de condensatoare și Abbe aplanatic (aplicabil pentru toate practice [c.36]
De asemenea, trebuie remarcat faptul că lentilele microscopului. utilizat pentru a epiflyuorestsentnogo cont trebuie să fie în măsură să treacă cantitatea maximă de lumină. lentile de contrast de fază sunt încorporate în aceste plăci de fază. de regulă, nu sunt potrivite pentru acest scop. Printre obiectivele destinate microscopia în câmp luminos. aveți nevoie pentru a alege una care are o deschidere numerică mare. Cu toate acestea, o creștere puternică nu numai inutile, chiar la nedorit, deoarece implică o scădere în intensitate a imaginii. Este mai bine să utilizați ocularele low-power. Comparativ cu microscopie microscopie fluorescente convenționale, precum și pe fond întunecat și permite celulelor să vadă mult mai mici, din moment ce fiecare celulă, în acest caz, este o sursă de lumină. Multe dificultăți în contul epiflyuorestsentnom menționat în literatura de specialitate [55, 108]. Ea poate fi cauzată de erori în examenul microscopic. și complexitatea procesului de filtrare prin membrană. În cazul în care sunt luate toate măsurile de precauție, apoi sub. microscop, vom vedea bacterii incandescent pe un fundal complet negru (fig. 8.3). [C.217]
Contul este realizată sub un microscop cu contrast de fază cu un obiectiv 40 până la 45 de ori cu o deschidere numerică de 0.65-0.75. Ar trebui să fie utilizat ocularul de 10 ori mai mare și o sursă de lumină ar trebui să permită o iluminare kolerovskoe probă. Medicamentul a fost plasat pe o treaptă mecanică și este supus băncii prin scanarea suprafeței membranei de-a lungul razei de la un capăt la altul. Câmpul de vedere este selectat aleatoriu fără a privi în ocular, și este important în procesul de calcul pentru a ajusta focalizarea pe rugozitatea de suprafață a membranei, adică. E. Aproximativ 10-15 microni deasupra acesteia. Dacă vorbim despre azbest în aer, cele mai multe dintre fibrele sale nu corespund definiției de NIOTZ ca dimensiunile lor sunt în general mai mici de 1 micron. Pentru a determina dimensiunea acestor fibre, se recomandă să se utilizeze un Porton net special (vezi. Fig. 8.5). [C.230]