8 Metode de determinare a proteinelor din lapte

8.1 Determinarea proteinelor totale și cazeină din lapte de Formalina

Metoda se bazează pe faptul că soluția apoasă neutră aminoacid în prezența formol neutru este capabil să crească aciditatea pentru a forma compușii în care ambii hidrogeni amino sunt înlocuiți cu o grupare metil.

Materiale și reactivi

Baloanele 50-100 cm 3; biuretă; capacitate pipetă de 10 cm3; alcool phenolphthalein soluție 1%; 0,1N soluție alcalină; formol neutru.

Balonul a fost de 50-100 cm3 pipetează 10 cm3 de lapte, se adaugă 10 picături dintr-o soluție 1% alcool fenolftaleinei, și toate se agită titrat cu soluție 0,1 N soluție alcalină la ușor colorație roz nu dispare sub agitare. În balon s-a adăugat 2 cm3 formol neutru, se amestecă. Ușor de culoare roz dispare.

Nota biureta nivel alcalin, balonul a fost din nou titrat la aceeași colorația ușor roz, ca prima dată, ca și prima dată, nu dispare în timpul agitării.

8.2 Metoda refractometrică de determinare a proteinelor (GOST 25179-90)

Metoda refractometrică se bazează pe măsurarea indicilor de refracție și lapte din zer fără proteine ​​derivate din aceeași probă de lapte, a căror diferență este direct proporțională cu masa a fracțiunii de proteină din lapte.

Instrumentation, Materiale și reactivi

Refractometru cu fracție de masă de proteină scară în intervalul 0 - 15%, o divizie scară de 0,1%; baie de apă inchisa pentru sticle; Se centrifughează pentru măsurarea fracțiunii de masă de grăsime în lapte; aragaz; flacoane, capacitate de 1000 cm3; pipetă 1 și o capacitate de 5 cm 3; flacoane cu tub de sticlă pentru medicamente, cu o capacitate de 10 cm 3; dopuri de cauciuc de pe documentația normativă și tehnică; clorură de calciu 2-apă; apă distilată.

Măsurarea Prepararea

O porțiune de 40,0 g de clorură de calciu au fost plasate într-un balon cu o capacitate de 1000 cm3, se toarnă în 500 cm3 de apă și se agită până la dizolvarea completă a sării. Conținutul balonului a fost încălzit la o temperatură de 20 ± 2 ° C și adus la semn cu apă.

Turnat în 3 flacoane cu 5 cm3 de lapte se adaugă 6 picături dintr-o soluție de soluție de clorură de calciu, 4%. Flacoanele sunt capsulate și conținutul lor amestecate prin răsturnare flacoanelor. Se pun fiolele într-o baie de apă, turnat în baie de apă, astfel încât acesta a atins nivelul de jumătate din înălțimea de sticle. Baia este acoperită și plasat pe o placă fierbinte electric, ajustat baie de apă la fierbere și se fierbe timp de cel puțin 10 min. Fără a deschide baia, apa fierbinte este turnată prin deschiderile din capac, turnat într-o baie de apă rece și se păstrează timp de cel puțin 2 minute în aceasta.

Baie deschisă este îndepărtată și flacoanele perturba cheag de proteine ​​prin flacoane viguroase agitând. Fiolele au fost plasate într-o centrifugă și se centrifughează timp de cel puțin 10 min. Pipetă rezultată din ser clar și aplicat la o măsurare refractometru prism 1-2 picături. Închideți iluminarea prismei de măsurare. Privind prin ocularul refractometrului, corectorul speciale de colorare a eliminat limita dintre lumină și umbră. Pentru a îmbunătăți claritatea limitelor măsurătorii efectuate după 1 min după aplicarea serului pe prisma, deoarece în acest timp eșantionul este îndepărtat din aer și suprafață mai bine umectată a prismei de iluminat. Realizarea pe o scară de „proteină“ nu este mai mică de 3 observații. Serul a fost îndepărtat din prisma refractometrului, se spală cu apă și șterse cu o hârtie de filtru.

Plasat pe prisma de masurare a 2 picături de testare și laptele efectuat conform scalei de „proteină“ este de cel puțin 5 observații, deoarece claritatea limitelor lumină și umbră în lapte este mai rău decât în ​​ser. Se calculează media aritmetică a observațiilor de ser și lapte.

Proporția de masă de proteine ​​din lapte (X1) în procente se calculează cu formula:

în cazul în care X2 - media aritmetică a rezultatelor observațiilor pe scara de lapte „proteine“,%;

HZ - media aritmetică a rezultatelor observațiilor pe scara de „proteină“ zer%.

Limita erorii admisibile a rezultatului măsurării este de ± 0,1% fracție de masă a proteinei dacă probabilitatea de încredere și divergență între 0,90 cele două determinări paralele ale proteinei fracțiunii de masă nu mai mult de 0,1%.

Pentru rezultatul măsurătorii final este valoarea mediei aritmetice a rezultatelor două calcule paralele de fracții masice de proteină înseamnă, rotunjire rezultatul până la a doua zecimală.

În laptele de vacă crud în conformitate cu Legea federală „reglementările tehnice cu privire la lapte și produse lactate“, fracțiunea de masă de proteine ​​ar trebui să fie în intervalul de 2,8-3,6%, dar nu mai puțin de 2,8%. Rata de bază a fracțiunii de masă de proteine ​​este de 3,0%.