Siguranța la locul de muncă în condiții de laborator biochimice

1. Este clasele de laborator întocmite în conformitate cu programa școlară, cu un notebook pentru a lua notițe. Nepregătiți pentru clasele de elevi pentru munca de laborator nu sunt permise.

2. Observați liniște și ordine. Monitor curățenia în laborator, nu fuma, nu bea din sticlă.

3. Lucrările la furnizarea de locuri de muncă, care se păstrează în ordine în timpul funcționării și se lasă curat după utilizare. Datoria grupului de studiu înainte de a părăsi laboratorul verifică puritatea locurilor de muncă și să livreze profesor sau tehnician de laborator.

4. Manevrați cu grijă reactivii și salvați-le. Reactivi de la un raft la altul nu transporta. După flaconul de reactiv de captură cu el imediat pentru a pune în aplicare închis anterior opritorul. Reactivii luate de la o masă comună, să se întoarcă imediat la loc după utilizare. Ca să nu se acumuleze în sticlele de reactivi la locul de muncă. Tuburile sunt puse pe masă doar partea din spate a soluțiilor pentru a se evita contaminarea. Luate din balon soluția înapoi în aceeași sticlă nu se toarnă. Este interzisă pentru a transfera pipetă de la o soluție la alta. Când alcaline arde arde ar trebui să loc repede se clătește cu apă și apoi cu o soluție slabă de acid acetic. Acid, care a căzut pe piele sau mucoase, trebuie clătiți rapid cu apă și apoi soluție de carbonat de sodiu 2%.

5. Aveți grijă deosebită atunci când se ocupă cu acizi concentrați și alcalii și substanțe inflamabile - alcool și eter. Nu se îndoaie peste un tub de testare, o ceașcă sau un vas care este încălzit prin acidul concentrat, alcalin sau alt reactiv.

6. Tubul a fost încălzit la o gaură pilot de la el însuși, dar nu prieteni. Lichid Cald în tuburi uniforme fără supraîncălzire într-un singur loc și aruncat. Nu se va încălzi fluidul de transfer de la locul de sticlă. Nu poate fi încălzit la punctul de transfer la un pahar de lichid. Este imposibil să se încălzească fluidul în vase închise. Lichide inflamabile (eter, benzen, etc.) nu pot fi utilizate în prezența unei flăcări deschise.

7. uscate Reactivii nu iau arme doar o lingura, lopata, spatula.

8. Nu reactivi nu probyvat gust.

9. Mâner cu sticlărie chimice, tuburi, tije. Mai ales pentru a monitoriza integritatea sfaturi de siguranță pipete, biurete și sticlărie volumetrice.

10. Nu dezordine chiuveta cioburilor de sticlă, folosiți un filtru, hârtie de turnesol, etc. care arunca în caseta de gunoi.

11. Neutilizat Acid balanțele și spălare alcalină departe în mod special ridicată în băncile capotă, și în orice caz, în chiuvetă.

12. Prin evaporare, calcinare, și cu acizi puternici, cu miros puternic substanțe gazoase și efectuate într-o hotă cu ventilație funcționează corespunzător. Doar în capota pentru a efectua toate reacțiile care au fost instruite să efectueze sub capotă.

13. manevreze corect încălzitoare electrice imediat și opriți-le la sfârșitul încălzirii.

14. Activarea și dezactivarea motorului într-o hotă pentru studenți este strict interzisă. Despre necesitatea de a include studenții de ventilație trebuie să spună profesorul sau tehnicianul.

15. Lucrările de laborator efectuate în picioare.

Reacțiile chimice 16. efectua strict procedura.

17. Nu distrage atenția de la colegii de serviciu.

18. Toate scurgerile, defalcate pe mesele eliminate imediat.

19. Nu merge fără a fi nevoie de un laborator.

20. Nu lucrați fără haina.

21. Toate lucrările în laborator pentru a efectua cu cea mai mare grijă, cu grijă, cu atenție, astfel încât să nu suporte un accident.

22. Studenții care nu respectă aceste norme fac obiectul recuperării până la interzicerea activității suplimentare în laborator.

Sarcina 1. Reacția la detectarea carbohidrat.

reacția cu # 955; timolul naftol și este un carbohidrat comun, care este folosit pentru a deschide carbohidrați în materialul biologic. Chimia reacției este redusă la faptul că sub acțiunea acidului sulfuric concentrat este format din pentoze furfurol, hexoze și de la - 5-hidroximetilfurfural:

În interacțiunea acesteia cu # 955; naftol de colorare caracteristică apare (violet) și cu timol - roșu.

Proceedings: Cele două tuburi se toarnă la 2 ml de soluție de zaharoză 1%. In tubul primul test se adaugă 5 picături de naftol, iar celălalt - aceeași cantitate de timol. In ambele pereții tuburilor turnat încet 1-2 ml de acid sulfuric, fără a se amesteca cu stratul apos. La stratul limită apare de culoare violet sau roșu.

Sarcina 2. Reacția Trommer.

Monozaharide, datorită prezenței aldehidă sau cetonă grupări libere pot fi oxidați la acizii corespunzători, sărurile metalice sunt reduse în mod simultan.

Reductoarele soluție alcalină mono - și - dizaharide recuperat hidroxid de cupru (II) și oxid de cupru (I).

Proceedings: o soluție pour tub 1-2 ml glucoză, un volum egal de soluție de hidroxid de sodiu adăugat sub agitare și în picături, o soluție de sulfat de cupru. În prezența glucozei care rezultă se dizolvă precipitatul de hidroxid de cupru, lichid de colorare în albastru. Stratul superior de lichid a fost încălzit până la fierbere. Aspectul galben (hidroxid

Cupru I), și apoi roșu de cupru oxid I) precipitat (indică o reacție pozitivă Trommer. Într-un alt tub de testare au fost amestecate 2 ml soluție de hidroxid de sodiu, cu câteva picături de culoare albastră, când precipitatul negru încălzit (oxid de cupru II) soluție de sulfat de cupru (II).

Sarcina 3. Reacția doborârii.

Ionii de reactiv de doborâre de cupru (II) sunt sub forma unui compus complex cu Tartrați. Mecanismul de reacție al hexoze (și orice glucide reducătoare) cu un reactiv de doborâre este aceeași ca și în reacția Trommer. Doborârea avantaj reactiv este că excesul de reactiv cu cupru nu intră sub formă de oxid de cupru (II) și nu mascheze reacția.

Proceedings: Tubul este fabricat din 1 ml de soluție de glucoză și 1 ml de doborâre reactiv. Amestecul a fost încălzit într-o flacără la lampa de alcool la fierbere. Urmărind formarea unui precipitat roșu de oxid de cupru (I) - Cu2 O.

Sarcina 4. Reacția de Selivanov.

Această reacție este folosit în special pentru detectarea cetoza, mai ales merge bine cu fructe și acele zaharuri complexe, care după hidroliză fructoză randament (zaharoză, inulină). Reacția se bazează pe formarea de fructoză prin încălzirea acidului 5-hidroximetilfurfuralul, care conferă produsului cu resorcinol condensare roșie. Aldohexoses dau, de asemenea, această reacție, dar este mai lent și în condiții specifice (temperatura, aciditatea mediului).

Proceedings: turnării reactiv tub Selivanova 1-2 ml, se adaugă 2-3 picături de soluție de fructoză și încălzite 1-2 minute într-o baie de apă la fierbere. Observați colorarea lichid în roșu.

Sarcina 5. Reacția BIAL.

Sub influența acidului clorhidric concentrat cu pentoze încălzire, deshidratare, convertite în furfurol. Acestea din urmă condensează cu ortsinom (metil - dihidroxibenzen) în prezența urmelor de clorură de fier (III) și formează un compus colorat în verde.

Proceedings: Țeava de turnare 1 ml dintr-o soluție pentoze, un reactiv egal volum ortsinovogo. Amestecul a fost încălzit într-o baie de apă la fierbere timp de 20 de minute. Apare culoarea verde a soluției.

Sarcina 6. Reacția cu phloroglucin.

Când este încălzit cu acid clorhidric, convertit la pentoză furfurol, care se condensează cu phloroglucin (trioxybenzenes) dă-vișiniu colorație.

Proceedings: turnării tub 2,1 ml dintr-o soluție de pentoze sau ușor rumeguș adăugat volum egal de acid clorhidric concentrat și câteva cristale de floroglucinolul. Tubul a fost plasat într-o baie de apă fierbinte. Există o culoare roșie.

Sarcina 7. Răspunsul la zaharoză.

Zaharoza nu posedă capacitatea de a reduce, acest lucru se datorează unui stat legat de grupări carbonil hexoze care alcătuiesc molecula sa.

Proceedings: Cele două tuburi au fost turnate cu 2 ml de soluție de zaharoză. Unul a adăugat câteva picături de acid clorhidric, se agită și se fierbe timp de 3-5 minute pe o flacără deschisă. Lichidul este răcit, neutralizat la turnesol prin adăugare de NaOH 10% r-ra. Două eșantioane au reacționat Trommer.

reacție negativă Trommer în tubul primul test indică absența grupărilor carbonil libere. O reacție pozitivă în al doilea Trommer (fiert) - pierderea sediment roșu indică faptul că a avut loc fierberea, hidroliza zaharozei și elibera gruparea carbonil.

Sarcina 8. Reacția amidonului cu iod.

În reacția amidonului cu iod format adsorbție compus complex pătate albastru. Când coloratie încălzit dispare, dar reapare la răcire, indicând formarea complecșilor instabile de amidon cu iod. Decolorarea se produce, de asemenea, atunci când se adaugă hidroxid de sodiu.

Proceedings: Țeava de turnare 2,3 ml din soluția de amidon se toarnă 1 picătură de soluție Lugol. Lichidul devine albastră. Conținutul tuburilor sunt împărțite în 3 părți. Prima parte 1-2 ml soluție de hidroxid de sodiu, la un al doilea 2-3 ml de alcool etilic, a treia parte este încălzită. În toate cazurile, culoarea dispare, indicând faptul că proba cu iod trebuie efectuată numai cu o soluție rece de amidon.

Sarcina 1: Detectarea grăsime

Răspunsul la detectarea grăsimilor este așa-numita acroleina probă. Acest proces este deschis în precipitat grăsimile glicerol care prin încălzirea grăsimii este parțial transformată în glicerină liberă. glicerol Următorul pierde apă și formează o aldehidă nesaturată - acroleina, ușor de detectat prin miros iritant specific (asupra prezenței sale depinde în mare măsură sufocante fum miros de bucătărie). studiu Acroleina efectuat prin încălzire în prezența grăsimii sau K bisulfat Na (ca agent de deshidratare). Lipidele care nu conțin glicerol (ceară steridy) reacția acroleina nu este permisă.

Procedură: Se pune tuburile 1-2 în picăturile de grăsime uscate prindeți adăugat uscat sulfat acid de potasiu și se încălzește până la vapori dens de culoare albă. miros iritant Sharp vorbește despre formarea acroleina. Rezultatele sunt înregistrate în tabelul următor:

Sarcina 2. reacție calitativă a lecitinei

Lecitina este unul dintre reprezentanții fosfatide care fac parte din membranele biologice.

Lecitinele sunt parte a celulelor animale și a organismelor vegetale. Deosebit de bogat in creier, tesutul nervos, ficat, rinichi, gălbenuș de ou, spermă, sânge. Fosfatide difera solubil în solvenți organici. Majoritatea fosfatide slab solubil în acetonă, care este utilizat în alocarea obiectelor lor biologice.

Proceedings: Tubul este introdus a fost adăugat 50-100 mg de gălbenuș de ou 5,3 ml de alcool la fierbere. Conținutul tuburilor se amestecă bine cu o baghetă de sticlă timp de 5-10 minute. După aceea, lichidul se filtrează într-un tub uscat. Într-un alt tub de testare se toarnă 2-3 ml acetonă și filtratul s-a adăugat, în picături. Observați apariția turbidității, urmată de pierderea de nămol lecitină. La filtrat rămas a fost adăugat, în picături de apă distilată și observând formarea unei emulsii stabile.

Sarcina 3. Testele calitative pentru colesterol

Colesterolul este un sterol este un alcool ciclic secundar.

Mulți dintre colesterolul conținut în țesutul nervos, bilă, spermă, lanolină. Aceasta este o componentă structurală importantă a celulelor, ea servește ca materie primă în biosinteza hormonilor steroizi, vitamine D, acizi biliari și alți compuși importanți. Colesterolul și esterii săi nu sunt solubili în apă, dar ușor solubili în solvenți organici: cloroform, eter, alcool fierbinte și altele.

Proceedings: Mortarul se triturează cu aproximativ 3 g de creier zdrobit gips 6-10g într-o masă omogenă. Masa groasă rezultată cu o spatulă acoperită cu un strat subțire pe o placă de sticlă și se usucă într-un cuptor (60 ° C). Masa uscată a fost purificată prin bisturiul în mortar uscat și triturat. Pentru pulberea uscată din flacon se adaugă 6 ml de cloroform, complet agitate timp de 5 minute și se filtrează. Filtratul a fost turnat în 3 tuburi și utilizată pentru reacția de culoare.

a) Reacția Salkovskogo

La filtrat se adaugă același volum de acid sulfuric și se agită ușor. După separarea fazelor se observă schimbarea culorii: stratul superior care conține colesterol în cloroform, se colorează în violet - culoarea roșie și stratul inferior de acid sulfuric - în întuneric - roșu cu fluorescență verde. O soluție de colesterol în cloroform, se toarnă într-un tub uscat. Acoperirea soluției în timp devine violet, apoi un verde și în final la galben.

b) Reacția Lieberman - Burchard

Într-un flacon uscat cu filtratul s-a adăugat 10 picături de angidrina acetic și 2 picături de acid sulfuric concentrat. Conținutul tubului agitat bine și se observă formarea de culoare roșie, care se transformă în roșu - cheie violet, violet, albastru și verde. Cu un conținut scăzut de colesterol în soluție se formează direct coloratie verde.

c) Reacția Vindauza

In tubul de test la o soluție de colesterol în cloroform se adaugă cu atenție câteva picături ml de soluție 5% de brom în acid acetic glacial până la colorarea brun, care nu dispare în câteva minute. Formată în timpul dibromholesterol reacție a precipitat sub formă de cristale în formă de ace.

Sarcina 5. emulsionarea grăsimilor

Acțiunea enzimelor gastro - grăsimile și țesuturile tractului intestinal, care sunt disponibile în starea emulsionată. În gastro - intestinal sunt condițiile pentru transformarea grăsimii în emulsie, și stabilizatorul de bază (emulsifiant) este o sare a acizilor biliari, proteine, fosfolipide, săpunuri și bicarbonați ai metalelor alcaline.

Procedură: Ia 5 tuburi. Primii 1 ml de apă se toarnă într-un al doilea - 1 ml de bilă, a treia 1 ml de soluție de proteină, 1 ml din soluția de săpun patra, a cincea soluție de carbonat de sodiu 1 ml. La fiecare tub s-a adăugat 5 picături de ulei de floarea soarelui, agitat viguros și lăsat timp de 5 minute. In toate tuburile cu excepția emulsia stabilă formată prima dată.