Metode de investigații citologice - botanică - Nevedomskaya cărți de biblioteci din România EO

2. Metode tsitologіchnih doslіdzhen

Microscopie (din Mikros grecești - mici și skopeo - vizionarea) - examinarea la microscop - este metoda principala citologia

Metode care utilizează lumina (optic) microscop (Fig. 4) se numește metoda prin microscopie optică pentru a studia structura celulei de ansamblu si planul de organite individuale de cel puțin 200 nm ca microscop cu lumină modernă oferă crescut site-uri de 2-3 mii de ori Utilizare vezi organite mari (mitocondriile, hloroplastyasti).

Stadiul 3

Microscopia Lumina se bazează pe faptul că printr-un obiect transparent sau translucid de studiu sunt razele de lumină care intră ulterior pe lentile și lentile ocularului sistem obiectiv vizual Sâ bilshuyut mărire obiect de cercetare poate fi definit ca creșterile de produs și okulyarra lentila de obiect.

Structura celulei de dimensiuni mici (de exemplu, ribozomului) a descoperit si studiat prin microscopie electronică, inventat în prima jumătate a secolului al XX-lea, microscop electronic dă o creștere a sute de mii de ori (până la 500 000 și mai mult) și ne permite de a studia ultrastructura celulelor - cele mai mici detalii ale stroeniyi lor.

Efectuarea de preparate pentru lumina si microscopie electronica - mai degrabă procedura complicată ia în considerare procedura pentru prepararea preparatelor temporare și permanente

Metoda de obținere a agenților temporari în timpul investigării structurii țesuturilor și organelor vii:

1 A făcut cu un aparat de ras sau transversal microtom sau secțiuni longitudinale au fost plasate pe o lamelă de sticlă într-o picătură de apă, parafină lichidă sau ulei de silicon, soluție de zahăr slab sau alte medii lichide de mai sus nu se întărește la vysyhaniiі.

2 Pentru a obține o mai bună monitorizare a diferențierii celulare și componentele acestora sunt utilizate în colorarea cu vivo a celulelor cu soluții slabe de colorant chimic inert - albastru de metilen, ervonogo neutru Th da in.

3 acoperit cu un capac de sticlă

Agenți temporari pot fi luate în considerare pentru câteva ore până când celulele nu pierd mijloacele de existență

Luați în considerare preparate pașii de bază polucheniyapostoyannyh:

1 Lock - Stop toate procesele vitale ale celulei și să mențină structurile utilizate pentru această răcire rapidă sau elemente de fixare chimice (alcool, formol și altele).

2 Obiectul de studiu este plasat într-un mediu lichid, care se intareste rapid la microscopie optică folosind parafină sau celloidin și pentru e - plastic Acest lucru le va face în felii subțiri

3 folosind dispozitive speciale (microtoame) fac secțiuni subțiri

4 secțiuni obținute au fost colorate cu diferite substanțe, de exemplu, pentru acoperirea unui miez care cuprinde un acid nucleic vopsele utilizate cu proprietățile de bază Secțiunile destinate micro electronice castrate, colorate cu săruri ale atomilor de metale grele care difuzează elektrononi.

Și în microscoapele luminoase și electronice obiect este privit în lumina transmisă trece un flux de lumină sau electroni prin ele Acest flux refractate de lentile în lentilă microscop optic de sticlă, și în format electronic - este condensator electromagneți direcționează lumina sau fascicul de electroni la un obiect și o lentilă aranjată pentru imagine obiect format de imagine sau de a trata fotografuyutfuyut.

Pe lângă microscopie convențională în lumină vizibilă și un fluorescent (fosfor) și microscopie UV Astfel preparatele lumina albastru-violet sau raze ultraviolete, care cauzeaza luminescenta (fluorescenta) mai multe substanțe organice celulare (pigmenți, vitamine, alcaloizi, etc.). Ele pot fi, de asemenea, coloranți specifici - Fluorocromii care formează compus gripă orestsiyuyuchi cu materialele de celule, neavând abilitatea de a fluorescenței naturale astfel de agenți fluorescenți RASSM a studiat în detaliu într-un microscop și care indică locația și numărul de componente individuale, celule Tovarăși, aceste detalii și complexitatea structurii nu este observată în microscopie convențională prin microscopie cu fluorescență pot fi examinate direct, nu au fost înregistrate sau celule ușor colorat în eparataratah înainte.

Alte metode de studii citologice sunt:

o centrifugare (celula a fost supus distrugerii și apoi separate organitele amestec într-o centrifugă la viteză mare; organite se depun pe fundul tubului, fiind straturi distribuite în funcție de densitatea lor, fiecare strat n pot fi recuperate și examinate separat) Această metodă este folosită pentru a studia structurile celulare individuale 1955 Belgian om de știință Christian de Duve, datorită utilizării acestei metode a arătat lizozomii, pentru care a fost acordat premiyayu Nobel a fost;

Metoda o cultura de celule (celule vii izolate sunt transferate într-un mediu de cultură steril, care este similar cu mediul lor natural, în aceste condiții, celulele sunt capabile să prolifereze și să afișeze alte semne de viață, schimbarea mediului kaya poate studia efectul acesteia asupra celulelor) Prin această metodă pentru studiu anumite substanțe toxice efect nu își pierd animalele de laborator este suficienta pentru a utiliza celule crescute în Turi sha în aceste sisteme model poate verifica efectele medicamentului prep Tovarășe, stimulente, diverși factori fizici și alte, utilizarea unei culturi de celule umane este extrem de important pentru investigatii ologichnih medicale si bi Se poate înlocui invalidă etic experimente pe oameni, pe baza tehnologiei de celule dezvoltat metoda, cu care construite organisme cu date le proprietăți în avans Astfel, din mai multe posibil să crească întreg celulele vegetale rastenieoslinu;

Metoda o de studiu in vivo (investiga celulele vii, procesele metabolice - mișcarea citoplasmei, divizare, etc.)