Metoda de cercetare bacteriologică
TOPIC: sterilizare, de asepsie, antisepsie, dezinfectare.
Principii, cultivarea metodelor de microorganisme și izolarea culturilor pure.
Metoda de cercetare bacteriologică. Etapa 1.
1. Să fie familiarizați cu metodele de bază de dezinfecție și sterilizare, utilizate în microbiologie și medicină.
Principiile metabolismului particular microorganism 2. Cunoștințe de cultivare în laborator.
3. Pentru a stăpâni stadiul 1 metoda bacteriologică de diagnosticare a bolilor infecțioase.
1. Metode, dispozitive și moduri de sterilizare a mediilor de cultură, sticlă de laborator, instrumente medicale.
2. Principalele grupe de dezinfectanți, mecanismul lor de acțiune, domeniul de aplicare și metoda de aplicare.
3. Numirea mediilor de cultură în practica microbiologică.
4. Principiul preparării culturilor pure de microorganisme și esență metoda bacteriologică ca „standardul de aur“ în diagnosticul bolilor infecțioase.
5. Scopul secvenței de 1 și fază metoda bacteriologică a izola culturi pure de microorganisme.
1. Selectați mijloace, sterilizarea și modul de dezinfecție, în conformitate cu obiectivele specifice.
2. Descrieți mediile nutritive propuse utilizate în practica microbiologică.
3. Se efectuează etapa 1 metoda bacteriologică izolarea culturilor pure de microorganisme aerobe.
1. efect bacteriostatică și bactericidă a temperaturilor joase și înalte asupra microorganismelor.
2. Efectul diferitelor clase de substanțe chimice pe microorganisme. Antiseptice și dezinfectante.
3. Definiții: sterilizare, dezinfectare, aseptice, antiseptic.
4. Metode, aparate și moduri de sterilizare, alegerea lor în funcție de proprietățile unui obiect sterilizabile.
5. Grupul principal de dezinfectanți și tactici de utilizare a acestora în instituțiile de îngrijire a sănătății.
6. Principii și metode de cultivare a microorganismelor.
7. Substante nutritive: concept; Cerințe pentru acestea; clasificare.
8. Conceptul de tulpină, colonii de culturi pure de microorganisme.
9. REZUMAT Metoda bacteriologică și utilizarea acestuia.
10. Scopul și secvența prima etapă a metodei bacteriologică aerobe de alocare.
Sarcinile efectuate în timpul angajării (UIRS):
1. Citiți instrumentele utilizate pentru sterilizare în practica medicală și microbiologice: sterilizator cu abur (autoclavă), Cuptor Pasteur.
2. Selectați dispozitivele și modurile de sterilizare a mediilor de cultură, sticlărie de laborator, instrumente medicale.
3. Citiți dezinfectanții utilizați în practica medicală și microbiologice. Selectați dezinfectanți și modul de dezinfecție pentru instalațiile propuse.
4. Pentru a vizualiza diferitele mediile nutritive utilizate în practica microbiologică, dau răspunsul lor asupra compoziției, consistența, scopul.
5. Se efectuează etapa 1 metoda bacteriologică izolarea culturilor pure aerobi:
5.1. Se prepară un preparat fix a materialului de testat, prin colorare Gram, promikroskopirovat și identificarea microorganismelor identificate prin proprietăți morfologice și tinctoriale.
5.2. Sow materialul testat de „bar cu o platformă.“
5.3. Semănarea materialului de testat prin Drigalski (demonstrație).
6. Pentru a vizualiza setul de instrumente pentru colectarea și transportul materialului patologic.
instrucțiuni metodice a îndeplini sarcinile de cercetare:
1. Introducere dispozitive folosite pentru sterilizare: sterilizator cu abur (autoclavă), Cuptor Pasteur.
1.1. sterilizator cu abur (autoclavă) - sterilizarea cu abur sub presiune.
Metoda cea mai fiabilă și versatilă de sterilizare în practica medicală și microbiologică este sterilizare cu abur sub presiune. Produce-l într-o autoclavă, în care obiectele sterilizate sunt încălzite cu abur saturat la presiune supraatmosferică. Între manometru și temperatura aburului saturat are următoarea relație:
Zero presiune este considerată presiunea atmosferică normală (760 mm Hg. V.).
Sterilizarea se realizează numai cu serviceability deplină a autoclavei și funcționarea corectă a acestuia de către personal instruit. Prin urmare, monitorizarea constantă a regimului de sterilizare care este produs fizic (termometru maxim și colab.), Biologică (testul bioanaliză culturile de spori de microorganisme) sau prin metode chimice (teste chimice indicatori de tip IP).
Controlul modului autoclavă de sterilizare se realizează prin mijloace chimice la fiecare autoclavă de încărcare. Test chimic - tub de sticlă cu o substanță chimică având un anumit punct de topire: antipirina, rezorcinol - 110 ± 1 °, Acid benzoic - 120 ± 2 °, benzamidă - 126 ± 1 °, uree, nicotinamida, D (+) - manoză - 132 ± 2 °. Compoziția chimică a testat administrat colorantului anilină (magenta, violet de gențiană, etc.) care colorează uniform substanța la topirea acestuia. În prezent, indicatorii de tip IP sunt utilizate în mod frecvent (firma „Vinar“ România), reprezentând o fâșie de hârtie acoperită cu un strat de amestec indicator și adaptat pentru controlul vizual operativ nu numai temperatura, ci și timpul de sterilizare (EC-120, EC-132) . efectuate trimestrial modul de control de sterilizare cu ajutorul testului bioanaliză cultura de spori de Bacillus stearotermophilus BKM B-718.
1.2. Pasteur cuptor - sterilizarea la căldură uscată.
Cuptor Pasteur sterilizat produse din sticlă, metal și cauciuc pe bază de cauciuc siliconic. Sterilizare: 160 ° C - 150 minute; 180 ° C - 60 min. Modul de control sterilizare la fiecare ciclu prin intermediul unor indicatori de sterilizare EC-160, EC-180; pe o bază trimestrială - folosind testul de cultură biotestare de spori de Bacillus licheniformis bucăți. G BKM B-1711 D.
2. Completați tabelul №1 acasă.
Medii de cultură: - IPA; - Hiss
Seringi (marca 200 °)
,, instrumente metalice rezistente la coroziune chirurgicale ginecologice
Dressing si materiale de sutura, lenjerie chirurgicale
3. Citiți dezinfectanții și completați tabelul de sesiune №2, folosind aplicația №1, 2.
4. Citiți mediul de cultură și completați tabelul de sesiune №3 «medii de cultură„.
Numele mediului nutritiv
5. Microbiologie clinică ca ramură microbiologiei medicale rezolvă două sarcini principale: diagnosticul etiologic al bolilor infecțioase și alegerea rațională a mijloacelor de tratament cauzal.
Metoda principală de diagnosticare microbiologice. care să permită rezolvarea acestor probleme, o metodă bacteriologică. Esența metodei bacteriologice implică separarea unei culturi pure a agentului patogen, pentru a determina tipul și sensibilitatea la agenții antimicrobieni.
Alegerea materialului depinde de tipul de boală și localizarea preferențială a agentului patogen într-un anumit stadiu al dezvoltării sale (patogeneza). Materialul poate fi sânge, lichior, secretie plăgilor, spută, fecale, urină și altele. D. Technics materialul gard este important în obținerea unor rezultate fiabile.
materialul patologica de la un pacient este de multe ori un amestec de microorganisme. În acest sens, sarcina este separarea lor și obținerea de colonii izolate. O colonie izolată, ca urmare a reproducerii celulelor microbiene și constând dintr-un singur tip de celule este baza pentru obținerea unei culturi pure. Practica microbiologică de a folosi diferite metode de obținere colonii izolate. Cele mai frecvent utilizate sunt:
1. Însămânțarea materialul de testare de „bara de la platforma“ - materialul de testat se aplică pe suprafața unui mediu nutritiv dens într-o zonă limitată, și apoi împărțit prin însămânțare lovituri paralele frecvente.
2. Metoda Drigalski - materialul introdus în prima ceașcă cu un mediu nutritiv și însămânțate cu o spatulă, inoculată succesiv cu aceeași spatulă, fără sterilizare ea, inca 1-2 cani.
3. Metoda culturilor sector - materialul testat este inoculată cu o buclă succesiv în mai multe sectoare. Când această tehnică de însămânțare definită (metoda Gould) permite nu numai pentru a obține colonii izolate, dar, de asemenea, se determină numărul de microorganisme în 1 ml (g) a materialului, care este esențial în determinarea rolului etiologic al patogeni oportuniști (UTM).
5.1.Provedenie 1 pas metoda bacteriologică aerobă a alocării:
· Din materialul de testare fix prepara un colorant medicament prin metoda Gram promikroskopiruyte, efectuează identificarea microorganismelor detectate proprietățile morfologice și tinctoriale; notați numărul de microorganisme. Rezultatele sunt înregistrate în procesul-verbal și să tragă o concluzie;
· Sow materialul de testat la o jumatate de cana cu un mediu nutritiv dens de „bar cu platforma“;
· Sow materialul testat pe trei cești cu un mediu nutritiv prin Drygalski (demonstrație);
· Placi semn, indicând data semănatului și puneți-le cu capul în jos într-o cameră termostatică la 37 ° C timp de 18-24 ore.
6. Mijloace de colectare și livrare a materialului patologic
Notă: * - utilizat în cazul în care timpul de livrare a materialului în laborator, după primirea depășește 1,5-2 ore.
Întrebări pentru auto-control:
1. Numele și justifica principiile de cultivare a microorganismelor.
2. De ce la semănat materialului patologic folosit electivă diferențială medie de diagnostic și mediu de acumulare.
3. Justificați principiu pentru obținerea culturilor pure de microorganisme.
4. Metoda ce bacteriologică este „standardul de aur“ în diagnosticul microbiologic al bolilor infecțioase?
5. În cazul în care procesele chimice și biologice pentru prepararea culturilor pure de microorganisme?
6. Care este sterilizarea diferența de dezinfecție?
7. Explicați scopul de sterilizare și dezinfectare în practica medicală și microbiologică.
8. Justify avantaj al utilizării sistemelor sensibile la temperatură în monitorizarea modului de sterilizare (de exemplu, compania „Vinar“ indicator IP, România).
în cursuri de microbiologie.