Diagnosticul de laborator al Mycoplasma

Material pentru studiul poate fi pacientului în serul sanguin și secreții de la organele infectate (spută și altele asemenea).

1. Teste rapide (reacție): ELISA și IFA - pentru detectarea antigenului; PCR

2. Metoda bacteriologice (cultură cantitativă) este utilizat pentru detectarea micoplasmelor urogenitale.

3. Serodiagnosis (reacție): IFA și RIF - detectarea antigenului;

4. Diagnosticul genetic molecular - PCR (cantitativ), hibridizarea ADN-ADN.

DEMONSTRATsIIRikketsioznye antigenele combinat tifos uscat vaccin viu E, vaccin viu uscat de koksiell burneti M-44, ser de diagnostic, antibiotice.

Lecția numărul 26TEMA: Bazele de Micologie Medicala

LISTĂ DE VERIFICARE

1. Metode de diagnostic de laborator ale infecțiilor fungice și caracteristicile acestora. Clasificarea generală a infecțiilor fungice și caracteristicile generale ale grupurilor. 2. micozele superficiale (Agenti patogeni keratomikozov): spotted lipsindu lichen negru, negru Piedra, alb Piedra. Diagnosticul microbiologic. Patogenii epidermophytosis picioare (dermatomicoze) atlet și unghiile, Microsporum, Trichophyton, favus, rubrofitii. diagnostika.3 microbiologice. Patogenii sau micozele subcutanat subkutannyh: sporotricoză, cromoblastomicoză, micetom, feogifomikoza. diagnostika.4 microbiologice. Agenții cauzatori ai micoze sistemice sau profunde: histoplasmoza, blastomicoza, paracocciodioidomicoza, Coccidioidomicoza, criptococoza. diagnostika.5 microbiologice. Agenții cauzatori ai infecțiilor oportuniste fungice: candidoză, zygomycosis, aspergiloza, penitsillioza, Fusarium, pneumocistoza. diagnostika.6 microbiologice. Patogeni mycotoxicosis, diagnostic microbiologic. ciuperci Neclasificate: lobomikoz, rhinosporidios. Diagnosticul microbiologic.

Caracteristici gribovGriby - eucariotelor heterotrofe cu un aliment proces de adsorbție,

propagate sexual sau asexuat prin spori. Peretele celular este format din 2 h straturile naruzhnogo- vnutrennego- chitină și celuloză.

Structura de ciuperci: corp ciuperca poate consta dintr-o singură celulă sau celule, peretele celular totală - hife care, atunci când formele asamblate un miceliu.

Reproducerea de ciuperci: un punct de vedere sexual sau asexuat prin spori.

Tipuri de creștere fungice

3. Identificarea proprietăților culturale și biochimice.

4. Determinarea culturii antifungic metoda susceptibilitate disc de difuzie izolată.

Bolile cauzate de fungi patogeni sunt numite micoze. Micoze sunt clasificate în funcție de procesul de localizare și agresivitatea agentului patogen împotriva organismului normal sau slăbit. Aloca suprafață (keratomikozy), piele (dermatomicoze), subcutanată și profundă (sistemică) micoze, oportuniste și mycotoxicosis.

În cazul dezvoltării ciupercilor micozelor superficiale se produce pe suprafața țesuturilor epiteliale (epiderma, par, unghii) fără penetrare în țesutul viu. Răspunsul imun și răspunsul inflamator sunt absente. Leziunile nu sunt periculoase pentru viață, de multe ori nu necesita un tratament special și de a crea doar o problema cosmetica. Exemple de micoze sunt multicolore (pitiriazis) versicolor (patogen. - Pityrosporum furfur biovar orbiculare) (. P.furfur biovar ovale) si dermatita seboreica.

În cazul infecției micozelor cutanate se limitează la un strat cornos al epidermei, înfrângerea unghiile și părul. Simptomele principale cauzate de un raspuns inflamator in epiderma, derma si foliculii de par. metaboliți fungici declanșează inflamația acută și penetrarea antigenilor în epidermă transformat răspunsul imun la dezvoltarea de hipersensibilitate de tip întârziat. leziuni ale pielii și unghiilor (onicomicoza) pot cauza Candida și (rar) mucegai nedermatofitnye (diferite tipuri de Aspergillus. Penicillium. Alternaria. Fusarium, etc.). Este întotdeauna o infecții oportuniste secundare asociate cu slăbirea rezistenței organismului.

micozelor subcutanat apar atunci când derapajul sporii traumatice ciuperci saprofite în țesutul subcutanat (de exemplu, așchii). Există o reacție inflamatorie cronică (granulom, uneori cu componenta piogene), care este distribuit la nivelul pielii (derma si epiderma), dar de obicei nu se extinde dincolo de tumora primară. Cele mai frecvente micozele subcutanate se găsesc în țările tropicale. Omniprezența are doar Sporotricoza (Sporotrix schenckii).

System (adâncime) micoze sunt cele mai severe infecții fungice. Patogenii micozelor profunde - ciuperci dimorfici care trăiesc în sol sau descompunere substraturi organice și se găsesc în anumite zone geografice. Infectia umana se produce prin inhalarea agentului patogen. Principalul obiectiv al creșterii - leziune ușoară, dar a cailor respiratorii, de obicei, este ușoară și se remite spontan. Formele mai puțin frecvent apar diseminate care implică organe interne, prin urmare, un grup de boli este de asemenea cunoscut sub numele de micoze sistemice. Prognosticul formelor diseminate de severe netratate și de multe ori fatale.

Ciupercile au un arsenal mare de factori de adeziune, care pot fi agățate pe diferite tesuturi si substraturi artificiale. Colonizarea fungilor este însoțită de producerea de enzime hidrolitice care distrug barierele tisulare, facilitând penetrarea. Agenții cauzatori ai infecțiilor fungice nu produc toxine specifice și a redus la patogeneza proceselor inflamatorii la locul de infestare cu fungi. dezvolta granuloame, uneori cu supurație în centrele de colonizare. Pentru agenții micozele sistemice caracterizate prin invazia peretelui vascular cu tromboză, ischemie tisulară și necroză, deschizând calea spre infecția țesuturilor profunde. Acest grup include histoplasmoza (Histoplasma capsulatum), (Cryptococcus neoformans) Cryptococcus, blastomicoza (Blastomyces darmatidis), Coccidioidomicoză (Coccidioides immitis) și paracocciodioidomicoza (brasiliens Paracoccidioides).

infecții fungice oportuniști cauzate de specii saprofite penetrante din mediul extern sau o parte a comunităților microbiene ale corpului uman. Patogeni este foarte scăzută, și de obicei nu provoacă leziuni la persoanele sanatoase, si se dezvolta numai în corpul imunocompromiși. Grupurile de risc sunt pacienții cu diabet zaharat, arsuri, traumatisme, tumori maligne, nou-născuții prematuri, pacienții cu SIDA și altele. factor predispozant este utilizarea prelungită a antibioticelor. Cei mai mulți dintre agenții micozelor oportuniste se referă la saprofite care infectează oamenii prin tractul respirator sau tractului digestiv. Cele mai cunoscute boli ale acestui grup includ aspergiloza (Aspergillus fumigatus), zygomycosis (unele specii Rhizopus, Mucor, etc.) Și penitsillez (unele specii de Penicillium). Spectrul infecțiilor fungice este în continuă creștere, în primul rând din cauza epidemiei de SIDA. Cu toate acestea, cel mai adesea printre agenții patogeni secundare infecții fungice Candidoza apare - poate singurul micozelor oportunistă natura endogena.

Fungi utilizate nu numai slăbit imunitatea, dar poate bloca în mod activ răspunsul imun prin suprimarea funcției limfocitelor T, macrofage, neutrofile, complement (gliotoksin Aspergillus fumigatus. Manan C. albicans și colab.).

Micotoxicoze. Micotoxicoze - un grup de boli cauzate de ingestia de metaboliți toxici, micotoxine generat de unele ciuperci colonizatoare alimente sau produse agricole. Cele mai frecvente patogeni micotoxine - ciuperci din genul Aspergillus și Fusarium.

Imunitatea. Micoza (cu excepția suprafeței) sunt însoțite de un spectru larg de răspunsuri imune. rol major în protecția antifungic este jucat de două mecanisme: răspuns dependent de T de macrofage, care acționează în cadrul inflamației granulomatoase și neutrofile, susținută de anticorpi și să completeze. Slăbirea unuia dintre cele trei elemente (fagocite, complement antitala) reduce eficiența reacției, predispunând la complicații invazive. Nu este o coincidență faptul că pacienții neutropenici sunt la risc pentru dezvoltarea formelor generalizate de infecții fungice oportuniste.

Diagnosticul microbiologic al infecțiilor fungice. Pentru diagnosticul infecțiilor fungice se utilizează microscopic (inclusiv histologie), micologic (cultura), serologice, metode de cercetare alergologice, molecular-biologice și altele. În funcție de manifestările clinice ale materialului de testare a bolii sunt: ​​păr afectat, fulgi de piele, bucăți de unghii, piele si unghii skarifikaty, puroi, spută, ganglionii punctiformă limfatici, măduva osoasă, organele interne, sânge, lichid cefalorahidian, suc gastric, bilă, scaun, . bucăți de țesut, etc, în scopul de a examina mai bine zona afectată folosi o lupă, la pacienții microsporia - lampă fluorescentă, în lumina care parul afectat a-smarald verde strălucire.

Metoda microscopică. Examinarea microscopică de studiu colorate și necolorate materiale (nativ). Atunci când microscopia de preparate native pot determina aranjamentul caracteristic de spori din păr afectat, fulgi de piele din miceliul si a zgarieturilor cu cuie. Formulările pictate sunt preparate dintr-un material având o consistență vâscoasă sau lichidă. Cele mai frecvent utilizate metode Coloratia Gram (celulele fungice, în general Gram-pozitive), Romanowsky-Giemsa, Gomori (metenaminovym argint), McManus (acid periodic și reactiv Schiff), Ziehl-Neelsen și altele. Dacă este necesar, se aplică ser imun luminescent (RIF).

Metoda biologică. Infecția se efectuează la animale experimentale, pentru a izola o cultură pură a ciupercii, studiul proprietăților patogene patogen, testarea de noi medicamente. Materialul administrat la animale prin diverse metode, să ia în considerare natura culturilor selectate date autopsie a animalelor și reacția de examinare makroorgnizma histologică.

Metoda serologică este folosit pentru a diagnostica histoplasmoză, blastomicoză și alte infecții fungice. Utilizați RA, RP, IHA, ELISA, IFA, imunoblotare.

Metoda alergica. Alergic da proba prin administrarea intradermică a alergenilor relevante (suspendarea culturii fungice, polizaharida ucise și din filtrare fracțiuni proteice din celule patogeni). Au fost citite la 20 minute (imediat) și 24-48 ore (reacție întârziată).

Examinarea histologică poate detecta ciuperca in tesutul, pentru a studia morfologia și caracteristicile procesului patologic cauzate de aceasta în corpul său.

Noi abordări pentru diagnosticul de laborator se bazează pe detectarea infecțiilor fungice în serul sanguin și alte substraturi fungalnyh antigeni, cum ar fi manan (candidoza) și galactomanan (aspergiloza), metaboliți specifici (d-manitol, acid oxalic - aspergiloza) și markeri genetici în PCR. Un sistem de testare pentru PCR permite detectarea de până la 40 de specii de fungi, inclusiv toate speciile importante din punct de vedere clinic.

Fungii din genul Candida - principalii reprezentanți ai infecțiilor fungice oportuniste. Candidoza este cauzata mai mult de zece tipuri de ciuperci de drojdie din genul Candida (de C. albicans, C.tropicalis, C.parapsilosis, C.krusei, C.lusitaniae, C.glabrata și colab.). Un lider absolut este C. albicans - comensală normală a cavității orale, intestin, piele vagin și, uneori. Candidoza - cele mai frecvente infecții fungice oportuniste ale omului, ca purtător de C. albicans are o natura aproape universală a oricărei încălcări grave a imunității locale sau sistemice pot declanșa activarea lor. Posibil infecție exogenă, în special în mediul spitalicesc, care este mai tipic de alte specii de Candida. Candidoza manifestă un spectru neobișnuit de larg de patologii clinice - delimitate de piele și membrane mucoase (afte, vulvovaginitis) la sistem leziuni mucoide și hematogene metastaze tractului în organele interne (pneumonie, meningita, endocardita, osteomielita, artrita și așa mai departe.); de la nou-nascuti înfrângerea debilitat la boli grave la adulți imunocompromiși.

Candida nu se referă la adevărata ciuperci dimorphic, la fel ca în țesuturile pot fi identificate ca celule de drojdie și hife. Tranziția în formă micelară poate fi observată prin cultivarea la temperatură mai scăzută (22-25 ° C) sau cu epuizarea mediului nutritiv. Faza de drojdie este reprezentat de celule ovale sau rotunde blastospores (4-8 microni), multiplicatoare înmugurirea multipolar. Faza de mycelial este reprezentat de lanțuri de celule alungite, formând pseudomycelium. Acesta aranjate aleatoriu blastospores de drojdie. Unele specii, inclusiv C. albicans. hlamidiospory formate terminale.

Infectarea se produce adesea endogenă. colonizarea inițială a copiilor Candida are loc în timpul trecerii prin canalul de nastere a mamei sau alăptării. candidoze urogenitale cu transmitere sexuală. Distinge candidoza pielii, unghiilor și crestele unghiilor, mucoase (afte), cronice generalizate (granulomatoase), diseminate (viscerala) candidoza.

Diagnosticul de laborator al candidozei este de a identifica tehnicile de microscopie patogen, izolarea și identificarea culturii fungice pure, detectarea materialului sau a antigenelor sale ADN și mostre serologice alergice.

Examinarea microscopică include studiul preparatelor colorate și necolorate. Gram Candida colorat în culoare violet închis, uneori cu o parte centrală roz a celulei, Ziehl-Neelsen - albastru incluziunilor galben rozalie de lipide, Romanowsky-Giemsa - o culoare roz-gălbui cu întuneric incluziuni mov volutin și cromatină roșu substanță. Medicamentele sunt gasite ovale înmugurite celule de drojdie sau rotunde și pseudomycelia. Diferențierea ciuperci patogene în materialul este de asemenea realizată folosind IEF.

cercetare Mycological. Izolarea a fost realizată pe cultură pură de medii dense Sabouraud wort agar-agar Candida sau altele asemenea. Pentru a suprima creșterea bacteriilor legate de aceste medii adăugate penicilină, streptomicină sau alte antibiotice. Culturile sunt incubate la temperatura de 30 C. Coloniile de Candida in 2-3 zile au dimensiuni medii, de culoare galben albicios și o suprafață mată, deoarece acestea devin creștere sidefiu umbră și au o înălțime în formă de dom. Cultura pură izolat pentru a identifica pseudomycelium semănate în medii lichide. - cartofi, morcovi, supa de cartofi, etc. Pentru a identifica ciupercile genului tip Candida determinat filamentarea, prezența clamidiospori, activitatea enzimatică studiu (C. albicans fermentează glucoza și maltoza cu producția de acid și de gaz). O caracteristică importantă a creșterii albicans fungi C. este abilitatea de a forma un tub - tub in forma de excrescențe blastospores (RT subiect).

Serologie. Serodiagnosis efectuate de obicei la forme viscerale candidozei. Utilizați RA, IHA, IFA. care se efectuează cu seruri pereche.

Alergie de cercetare. Când se efectuează un test de alergie folosind standard de Candida alergen -. Celulele fungice în forma lichida (200 de milioane per 1 ml), încălzită la 80 ° C timp de 2 h Alergen într-un volum de 0,1 ml injectat intradermic pentru copii depreciate diluat de 10 ori. Rezultatele reacției (roșeață, papule) reprezintă 24-48 ore. Eficacitatea poate indica răspunsurile imune individuale la antigeni genului fungi Candida.

Pentru diagnosticul infecției cu C. albicans folosind PCR.